[发明专利]一种利用水稻osa-miR5511基因提高水稻产量的方法有效
申请号: | 202011012122.4 | 申请日: | 2020-09-23 |
公开(公告)号: | CN112226458B | 公开(公告)日: | 2022-07-12 |
发明(设计)人: | 李绍波;王慧慧;王鑫;廖鹏飞;欧阳解秀;朱友林 | 申请(专利权)人: | 南昌大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H5/00;A01H5/10;A01H6/46 |
代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人: | 袁红梅 |
地址: | 330000 江西省*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 水稻 osa mir5511 基因 提高 产量 方法 | ||
1.一种利用水稻osa-miR5511基因提高水稻产量的方法,其特征在于,所述方法为通过基因工程技术对水稻osa-miR5511基因进行敲除或抑制其表达,所述水稻osa-miR5511基因的成熟序列如SEQ ID NO.1所示,其发夹结构序列如SEQ ID NO.2所示。
2.根据权利要求1所述的一种利用水稻osa-miR5511基因提高水稻产量的方法,其特征在于,所述基因工程技术为CRISPR基因编辑技术。
3.根据权利要求2所述的一种利用水稻osa-miR5511基因提高水稻产量的方法,其特征在于,通过CRISPR基因编辑技术对水稻osa-miR5511基因进行敲除或抑制其表达,包括以下步骤:
1)osa-miR5511的CRISPR敲除表达载体构建:利用CRISPR敲除靶点引物对、水稻U6a启动子和pYLCRISPR/Cas9质粒,经酶切、连接、转化大肠杆菌感受态细胞、阳性菌落PCR检测与测序分析,获得osa-miR5511的CRISPR敲除表达载体;
2)osa-miR5511缺失表达高产水稻植株的获得:将上述构建osa-miR5511的CRISPR敲除表达载体,经Ti质粒、植物病毒载体、显微注射、原生质体或DNA直接转化水稻愈伤组织/细胞,再培养成转基因水稻植株,并利用PCR、测序分析、qRT-PCR、Northern-blot方法鉴定获得osa-miR5511缺失表达的转基因水稻,经在大田中与野生型水稻一起种植,于成熟期进行考种比较分析,确定获得osa-miR5511缺失表达的高产水稻植株。
4.水稻osa-miR5511基因在提高水稻产量中的应用,其特征在于,抑制水稻osa-miR5511基因的表达,选育水稻产量提高的水稻品种。
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