[发明专利]阻断或减弱水稻circRNA编码位点的表达以提高水稻苗期生长性状的方法有效

专利信息
申请号: 202011015067.4 申请日: 2020-09-24
公开(公告)号: CN112175990B 公开(公告)日: 2022-04-01
发明(设计)人: 张勇;周建平;郑雪莲 申请(专利权)人: 电子科技大学
主分类号: C12N15/82 分类号: C12N15/82;C12N15/113;A01H5/00;A01H6/46
代理公司: 成都极纬知识产权代理有限公司 51320 代理人: 梁鑫;高芸
地址: 611731 四川省成*** 国省代码: 四川;51
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摘要:
搜索关键词: 阻断 减弱 水稻 circrna 编码 表达 提高 苗期 生长 性状 方法
【权利要求书】:

1.提高水稻苗期生长性状的方法,其特征在于:通过阻断或者减弱水稻中circRNA编码位点Os06circ02797的表达,以提高水稻苗期生长性状;所述苗期生长性状为苗期生长速度和/或苗期叶绿素含量。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的阻断或者减弱水稻中circRNA编码位点Os06circ02797的表达通过敲除水稻基因组中的circRNA编码位点Os06circ02797或者干扰circRNA编码位点Os06circ02797表达产物的作用进行。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述的干扰circRNA编码位点Os06circ02797表达产物作用的方法包括RNA干扰法、T-DNA插入或CRISPR-Cas法中的至少一种;所述的敲除水稻基因组中的circRNA编码位点Os06circ02797的方法为基因组编辑法、同源重组法或随机插入突变法中的至少一种进行。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述的基因组编辑法包括巨大核酸酶法、ZFN法、TALEN法或CRISPR-Cas法中的至少一种。

5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:当使用CRISPR-Cas法敲除水稻基因组中的circRNA编码位点Os06circ02797时,包括以下步骤:

a、设计针对水稻circRNA编码位点Os06circ02797的向导RNA;

b、构建可表达该向导RNA的Cas编辑表达载体;

c、用步骤b得到的表达载体转化水稻,利用CRISPR-Cas基因编辑体系得到转化植株;

d、收集转化植株的种子,筛选出水稻circRNA编码位点Os06circ02797定向编辑突变体种子,即得苗期生长性状改善的水稻突变体。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:所述的CRISPR-Cas法为CRISPR-Cas9法、CRISPR-Cas12a法或CRISPR-Cas12b法中的至少一种。

7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:步骤a中所述的针对水稻circRNA编码位点Os06circ02797的向导RNA的核苷酸序列为Seq ID No.1和Seq ID No.2所示。

8.阻断或者减弱水稻中circRNA编码位点Os06circ02797的表达的试剂在提高水稻苗期生长性状中的用途;所述苗期生长性状为苗期生长速度和/或苗期叶绿素含量。

9.根据权利要求8所述的用途,其特征在于:所述阻断或者减弱水稻中circRNA编码位点Os06circ02797的表达的试剂包括敲除水稻基因组中的circRNA编码位点Os06circ02797编码序列的试剂或者干扰circRNA编码位点Os06circ02797表达产物的试剂中的至少一种。

10.根据权利要求9所述的用途,其特征在于:所述的干扰circRNA编码位点Os06circ02797表达产物的试剂包括使用RNA干扰法、反义RNA法、CRISPR-Cas法、靶基因类似物法或短串联靶标类似物法中的至少一种所使用的试剂。

11.根据权利要求10所述的用途,其特征在于:所述干扰circRNA编码位点Os06circ02797表达产物作用的试剂包括针对circRNA编码位点Os06circ02797表达产物的siRNA、针对circRNA编码位点Os06circ02797表达产物的反义RNA、靶基因类似物、短串联靶标类似物、用于CRISPR-Cas法以编辑circRNA编码位点Os06circ02797表达产物的向导RNA中的至少一种。

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