[发明专利]阻断或减弱水稻circRNA编码位点的表达以提高水稻苗期生长性状的方法有效
申请号: | 202011015067.4 | 申请日: | 2020-09-24 |
公开(公告)号: | CN112175990B | 公开(公告)日: | 2022-04-01 |
发明(设计)人: | 张勇;周建平;郑雪莲 | 申请(专利权)人: | 电子科技大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/113;A01H5/00;A01H6/46 |
代理公司: | 成都极纬知识产权代理有限公司 51320 | 代理人: | 梁鑫;高芸 |
地址: | 611731 四川省成*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 阻断 减弱 水稻 circrna 编码 表达 提高 苗期 生长 性状 方法 | ||
1.提高水稻苗期生长性状的方法,其特征在于:通过阻断或者减弱水稻中circRNA编码位点Os06circ02797的表达,以提高水稻苗期生长性状;所述苗期生长性状为苗期生长速度和/或苗期叶绿素含量。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的阻断或者减弱水稻中circRNA编码位点Os06circ02797的表达通过敲除水稻基因组中的circRNA编码位点Os06circ02797或者干扰circRNA编码位点Os06circ02797表达产物的作用进行。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述的干扰circRNA编码位点Os06circ02797表达产物作用的方法包括RNA干扰法、T-DNA插入或CRISPR-Cas法中的至少一种;所述的敲除水稻基因组中的circRNA编码位点Os06circ02797的方法为基因组编辑法、同源重组法或随机插入突变法中的至少一种进行。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述的基因组编辑法包括巨大核酸酶法、ZFN法、TALEN法或CRISPR-Cas法中的至少一种。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:当使用CRISPR-Cas法敲除水稻基因组中的circRNA编码位点Os06circ02797时,包括以下步骤:
a、设计针对水稻circRNA编码位点Os06circ02797的向导RNA;
b、构建可表达该向导RNA的Cas编辑表达载体;
c、用步骤b得到的表达载体转化水稻,利用CRISPR-Cas基因编辑体系得到转化植株;
d、收集转化植株的种子,筛选出水稻circRNA编码位点Os06circ02797定向编辑突变体种子,即得苗期生长性状改善的水稻突变体。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:所述的CRISPR-Cas法为CRISPR-Cas9法、CRISPR-Cas12a法或CRISPR-Cas12b法中的至少一种。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:步骤a中所述的针对水稻circRNA编码位点Os06circ02797的向导RNA的核苷酸序列为Seq ID No.1和Seq ID No.2所示。
8.阻断或者减弱水稻中circRNA编码位点Os06circ02797的表达的试剂在提高水稻苗期生长性状中的用途;所述苗期生长性状为苗期生长速度和/或苗期叶绿素含量。
9.根据权利要求8所述的用途,其特征在于:所述阻断或者减弱水稻中circRNA编码位点Os06circ02797的表达的试剂包括敲除水稻基因组中的circRNA编码位点Os06circ02797编码序列的试剂或者干扰circRNA编码位点Os06circ02797表达产物的试剂中的至少一种。
10.根据权利要求9所述的用途,其特征在于:所述的干扰circRNA编码位点Os06circ02797表达产物的试剂包括使用RNA干扰法、反义RNA法、CRISPR-Cas法、靶基因类似物法或短串联靶标类似物法中的至少一种所使用的试剂。
11.根据权利要求10所述的用途,其特征在于:所述干扰circRNA编码位点Os06circ02797表达产物作用的试剂包括针对circRNA编码位点Os06circ02797表达产物的siRNA、针对circRNA编码位点Os06circ02797表达产物的反义RNA、靶基因类似物、短串联靶标类似物、用于CRISPR-Cas法以编辑circRNA编码位点Os06circ02797表达产物的向导RNA中的至少一种。
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