[发明专利]HHT在制备人体β-冠状病毒复制抑制剂中的应用

说明书

本发明公开了HHT在制备人体β‑冠状病毒复制抑制剂中的应用。发明人通过研究首次发现，HHT不仅对蛋白合成的第一步具有良好的抑制作用，而且出人意料地对蛋白合成延伸的每一步都有抑制作用，其可以更好地抑制长蛋白的合成。由于HCoV‑HKU1、HCoV‑OC43、SARS‑CoV、MERS‑CoV和SARS‑CoV‑2等β属冠状病毒有更长的ORF，对HHT更为敏感，因此HHT对其具有更好的复制抑制效果，从而为控制冠状病毒的复制提供了可行的方案。通过细胞实验和利用动物模型，发明人首次证实了HHT治疗β属冠状病毒(包括SARS‑CoV‑2)导致的疾病的效果。

技术领域

本发明涉及化合物的新应用，特别涉及高三尖杉酯碱在制备人体β-冠状病毒复制抑制剂中的应用。

背景技术

高三尖杉酯碱(Homoharringtonine HHT)是三尖科植物三尖杉或其同属植物中提取的生物碱。高三尖杉酯碱是常用的蛋白质合成抑制剂，已经被批准用于多种白血病和淋巴瘤的治疗(Jin,et al.2013；Alvandi,et al.2014；Lam,et al.2016；Sanchez-Petitto,et al.2018)。有几项在细胞模型或者是动物模型中的研究显示，高三尖杉酯碱对抑制病毒复制有一定效果(Kaur,et al.2013；Cao,et al.2015；Dong,et al.2018；Andersen,etal.2019)。高三尖杉酯碱用于治疗肿瘤的推荐剂量为：静脉滴注：1～4毫克/日，4～6日为1疗程。

CN109419804A公开了高三尖杉酯碱(HHT)具备广谱高效的抗病毒活性，可高效抑制7科类9种病毒(VSV、NDV、PEDV、TGEV、AIV、HSV 1、PRV、PRRSV、FMDV)感染宿主细胞及动物(鸡、鸡胚、猪等)，显著减少动物体内病毒量，且减轻感染症状。具体而言，当HHT的使用浓度为20-300nM时，可高效抑制7科类9种病毒(VSV、NDV、PEDV、TGEV、AIV、HSV-1、PRV、PRRSV、FMDV)感染宿主细胞(HeLa、Vero、Marc145、PK15细胞等)。

HHT对FMDV病毒毒力的影响结果表明，在PK-15细胞，50nM的HHT已经几乎可以完全阻断FMDV病毒蛋白VP0、VP1、VP2、VP3蛋白的表达。

CN109745328A公开了高三尖杉酯碱在制备预防口蹄疫病毒(FMDV)感染的药物中的应用。实验数据证实高三尖杉酯碱在浓度为6.2μM及以上浓度时，才可以提供IBRS-2细胞有效的保护。同时其实验数据表明HHT不会对FMDV的吸附产生影响，不会影响病毒进入细胞的能力。HHT只是在FMDV复制早期起作用，而进入病毒复制后期时则不能阻止病毒的复制。

CN109745328A与CN109419804A公开的实验数据提示：同样是针对口蹄疫病毒(FMDV)感染，在不同细胞中(CN109745328A使用IBRS-2细胞，CN109419804A使用PK-15细胞)HHT所起的作用不尽相同，其起效浓度有超过100倍的差异(CN109745328A需要的浓度超过6.2μM，而CN109419804A为50nM)。

因此，需要深入研究HHT的作用机制，鉴定HHT在抗病毒治疗中的适应症，并开发新的给药方式使HHT能够真正用于抗病毒的临床治疗。