[发明专利]一种促进骨髓间充质干细胞成骨分化的方法有效

专利信息
申请号: 202011020657.6 申请日: 2020-09-25
公开(公告)号: CN112080463B 公开(公告)日: 2021-10-26
发明(设计)人: 沈艳;于梦梦;马超群 申请(专利权)人: 深圳市旷逸生物科技有限公司
主分类号: C12N5/077 分类号: C12N5/077;C12N5/0775
代理公司: 南京中高专利代理有限公司 32333 代理人: 潘甦昊
地址: 518054 广东省深圳市前海深港合作区南*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 促进 骨髓 间充质 干细胞 分化 方法
【权利要求书】:

1.一种促进骨髓间充质干细胞成骨分化的方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)取人骨髓间充质干细胞于DMEM/F12培养基中进行培养,待细胞融合度达到80-90%时,用0.25%胰酶消化传代;

(2)将上述步骤(1)传代培养得到的骨髓间充质干细胞接种至分化培养基上,进行诱导分化;

所述分化培养基包括DMEM/F12培养基、胰岛素18-22μg/mL、地塞米松5-10ng/mL、抗坏血酸40-50μg/mL、磺丁基-β-环糊精15-23μg/mL、甜菜碱45-52μg/mL、乙酸铟10-15ng/mL、谷胱甘肽50-60μg/mL。

2.根据权利要求1所述促进骨髓间充质干细胞成骨分化的方法,其特征在于,所述分化培养基包括DMEM/F12培养基、胰岛素20μg/mL、地塞米松8ng/mL、抗坏血酸45μg/mL、磺丁基-β-环糊精20μg/mL、甜菜碱50μg/mL、乙酸铟12ng/mL、谷胱甘肽55μg/mL。

3.根据权利要求1所述促进骨髓间充质干细胞成骨分化的方法,其特征在于,所述步骤(1)中骨髓间充质干细胞接接种密度为1-2×104个/mL。

4.根据权利要求1所述促进骨髓间充质干细胞成骨分化的方法,其特征在于,所述步骤(2)中骨髓间充质干细胞的接种密度为2-4×105个/mL。

5.根据权利要求1所述促进骨髓间充质干细胞成骨分化的方法,其特征在于,所述步骤(2)中取传代培养至第3-5代的骨髓间充质干细胞接种至分化培养基。

6.根据权利要求1所述促进骨髓间充质干细胞成骨分化的方法,其特征在于,所述传代培养的比例为1:3-4。

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