[发明专利]一种促进骨髓间充质干细胞成骨分化的方法有效
申请号: | 202011020657.6 | 申请日: | 2020-09-25 |
公开(公告)号: | CN112080463B | 公开(公告)日: | 2021-10-26 |
发明(设计)人: | 沈艳;于梦梦;马超群 | 申请(专利权)人: | 深圳市旷逸生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077;C12N5/0775 |
代理公司: | 南京中高专利代理有限公司 32333 | 代理人: | 潘甦昊 |
地址: | 518054 广东省深圳市前海深港合作区南*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 促进 骨髓 间充质 干细胞 分化 方法 | ||
1.一种促进骨髓间充质干细胞成骨分化的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)取人骨髓间充质干细胞于DMEM/F12培养基中进行培养,待细胞融合度达到80-90%时,用0.25%胰酶消化传代;
(2)将上述步骤(1)传代培养得到的骨髓间充质干细胞接种至分化培养基上,进行诱导分化;
所述分化培养基包括DMEM/F12培养基、胰岛素18-22μg/mL、地塞米松5-10ng/mL、抗坏血酸40-50μg/mL、磺丁基-β-环糊精15-23μg/mL、甜菜碱45-52μg/mL、乙酸铟10-15ng/mL、谷胱甘肽50-60μg/mL。
2.根据权利要求1所述促进骨髓间充质干细胞成骨分化的方法,其特征在于,所述分化培养基包括DMEM/F12培养基、胰岛素20μg/mL、地塞米松8ng/mL、抗坏血酸45μg/mL、磺丁基-β-环糊精20μg/mL、甜菜碱50μg/mL、乙酸铟12ng/mL、谷胱甘肽55μg/mL。
3.根据权利要求1所述促进骨髓间充质干细胞成骨分化的方法,其特征在于,所述步骤(1)中骨髓间充质干细胞接接种密度为1-2×104个/mL。
4.根据权利要求1所述促进骨髓间充质干细胞成骨分化的方法,其特征在于,所述步骤(2)中骨髓间充质干细胞的接种密度为2-4×105个/mL。
5.根据权利要求1所述促进骨髓间充质干细胞成骨分化的方法,其特征在于,所述步骤(2)中取传代培养至第3-5代的骨髓间充质干细胞接种至分化培养基。
6.根据权利要求1所述促进骨髓间充质干细胞成骨分化的方法,其特征在于,所述传代培养的比例为1:3-4。
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