[发明专利]一种检测体内精神药物及其代谢物的方法和应用

权利要求书

1.一种检测人血或头发中精神疾病类药物及其代谢物的方法，其特征在于，所述方法为采用超高效液相色谱-紫外检测法，包括以下步骤：

所述精神疾病类药物及其代谢物包括奥氮平、9-OH利培酮、氯氮平、去甲氯氮平、利培酮、喹硫平、氯丙嗪、米氮平、氨磺必利、阿立哌唑、脱氢阿立哌唑以及帕罗西汀；

S1色谱条件：（1）色谱柱：C18色谱柱；（2）流动相：S1所述的色谱条件中：流动相：A相为0.05v/v%甲酸-水溶液；B相为0.05v/v%甲酸-甲醇溶液；（3）紫外检测器为VWD或DAD检测器，所述紫外检测器的检测波长为254nm、285nm或全波长；（4）流动相流速为 0.1~0.3mL/min；（5）柱温为35~45℃；（6）供试品溶液和混合标准品溶液进样量均为1.0～20.0μL；

S2工作溶液的配制：

S21内标溶液的制备包括：精密称定1~30mg卡马西平标准品，先用1~30mL甲醇溶解，再用40~70%v/v甲醇-水溶液定容，配制成浓度为0.1~0.5mg/mL的卡马西平储备溶液，再用40~70%v/v甲醇-水溶液稀释至1~5μg/mL，即得内标溶液；

S22混合标准品溶液的制备包括：

S221：分别精密称定各精神类疾病药物标准品奥氮平、9-OH利培酮、氯氮平、去甲氯氮平、利培酮、富马酸喹硫平、盐酸氯丙嗪、米氮平、氨磺必利、阿立哌唑、脱氢阿立哌唑、盐酸帕罗西汀1~30mg，先用1~30mL溶剂溶解后，再用40~70%v/v甲醇-水溶液定容，配制成浓度为0.1~0.5mg/mL的混标母液；

S222：将上述混标母液用40~70%v/v甲醇-水溶液进行稀释，配制成浓度为5~50μg/mL的标准溶液；

S223：精密吸取上述标准溶液10~30μL至6~10 mL离心管中，加入10~40μL 步骤S21制备的内标溶液，氮气吹干后加入400~1000μL空白血清，第一次涡旋0.5~2min，然后加入100-400μL浓度为1~3 mol/L的氢氧化钠水溶液以及甲基叔丁基醚2~7 mL，第二次涡旋2~5 min，再离心4~10min；

S224：取离心后的上清液氮气吹干后加入60~100μL 50%v/v甲醇-水溶液复溶，涡旋1~5min，即得；

S23供试品溶液的制备包括：

S231或S232步骤，其中，

S231人血供试品的制备包括以下步骤：S2311：取10~40μL上述S21制备的内标溶液氮气吹干后与400~1000μL融化后的待测冷冻人血清或血浆样品混合至7~10mL离心管中，第一次涡旋0.5~2min，加入100~400μL浓度为1~3 mol/L的氢氧化钠水溶液，以及甲基叔丁基醚2~7mL，再进行第二次涡旋2~5min；S2312：将涡旋后离心管以速度为2500~5000转/分离心4~10min，取离心后的上清液氮气吹干后加入60~100μL 40~70%v/v甲醇水溶液复溶，涡旋0.5~2min，即得；

S232头发供试品的制备包括以下步骤：S2321：取待测头发用丙酮、水依次清洗，干燥后剪碎，取10~40μL上述S21制备的内标溶液氮气吹干后与10~50mg待测头发样品混合至7~10mL离心管中，加入100-800μL浓度为1~3 mol/L的氢氧化钠水溶液，第一次涡旋0.5~5min，超声1~4h，以及甲基叔丁基醚2~7mL，再进行第二次涡旋2~5min；S2322：将涡旋后离心管以速度为2500~5000转/分离心4~10min，取离心后的上清液氮气吹干后加入60~100μL 40~70%v/v甲醇水溶液复溶，涡旋0.5~2min，即得；

S3测定法：将混合标准品溶液和供试品溶液分别注入超高效液相色谱仪，采用梯度洗脱程序，得到色谱图，获得所述精神疾病类药物及其代谢物保留时间t_R，即得，所述的梯度洗脱程序为：0min 5％v/v B、3min 15%v/v B、10min 20%v/v B、20min 30%v/v B、35min40%v/v B、40min 50%v/v B、45min 70%v/v B、48min 95%v/v B、52min 95%v/v B、52.1min5%v/v B、70min 5%v/v B。