[发明专利]绿针假单胞菌QOHPHZ-3作为1-羟基-吩嗪生产工程菌株的应用

说明书

本发明具体涉及绿针假单胞菌作为1‑羟基吩嗪生产工程菌株的应用。绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)Qlu‑1是一株筛选自潍坊蔬菜大棚菜椒根际的绿针假单胞菌，经测序得知该菌株含有吩嗪合成典型基因簇phzABCDEFG，以及吩嗪类的修饰基因phzO，可以产生吩嗪‑1‑羧酸以及2‑羟基吩嗪。在前期的研究中，本发明利用来自铜绿假单胞菌中的phzS替换phzO获得的QOHPHZ‑1，检测得知获得了1‑OH‑PHZ的积累，最高产量在20mg/L左右，为了进一步提高菌株的产能，本发明针对该菌株QOHPHZ‑1进一步进行了优化，获得的1‑OH‑PHZ高产菌株，有望作为工程菌株进行应用。

技术领域

本发明属于微生物工程菌株构建技术领域，具体涉及一种生产1-羟基-吩嗪的绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)QOHPHZ-1、绿针假单胞菌(Pseudomonaschlororaphis)QOHPHZ-2、绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)QOHPHZ-3，以及上述菌株作为工程菌株在农业生产领域的应用。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

生物农药是指利用生物产生的天然活性物质、衍生物或生物活体本身制备的农药。随着社会的生态意识加强，化学农药带来的环境污染问题得到了更加广泛的关注，生物农药由于具有环境友好等特点得到快速发展，有望成为未来农药生产领域的重要发展方向。

目前研究最为广泛的生物农药主要是微生物农药(以微生物活菌制剂为主体)和农用抗生素；微生物农药按照所利用的微生物资源可分为细菌类、真菌类和病毒类等。用作微生物农药的细菌主要有芽孢杆菌属、链霉菌属、假单胞菌属等，已有很多具有优异生防性能的细菌菌株被分离出来，例如采用放射农杆菌K84防治植物冠瘿病。目前也有芽抱杆菌被制作成商品制剂，例如AgraQuest公司利用短小芽孢杆菌QST2808生产了活菌制剂SONATA，它能有效控制链格孢属及葡萄孢属等真菌引起的植物疾病；还有利用解淀粉芽抱杆菌QST713菌株制备的菌剂SerenadeOpti，以及Novozymes公司的产品Taegro(含枯草芽抱杆菌，用于防治由镰刀菌属和丝核菌属引起的根腐病和枯萎病)。另外，国内的研究人员也对具有生物防治潜力的芽抱杆菌进行了广泛研究，如，韩艳霞与童蕴慧等人成功的实现了应用蜡状芽孢杆菌B3-7和地衣芽抱杆菌W10防治小麦全蚀病和西红柿灰霉病。陈志谊等利用枯草芽抱杆菌B-916开发了生物农药“纹曲宁”用于防治水稻纹枯病及伪黑穗病等。另外，许多假单胞菌因能产生多种抗菌物质也常用作微生物农药，这些抗菌物质包括嗜铁素、硝毗咯菌素、申嗪霉素、绿脓菌素、1-羟基吩嗪(1-OH-PHZ)等。其中，1-OH-PHZ具有较好的生防功能，而且在田间可降解，有比较好的应用前景。

基于发明人以往的研究结果，绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)含有吩嗪类物质合成的核心基因部件及吩嗪类相关修饰基因，并且绿针假单胞菌(Pseudomonaschlororaphis)本身致病性低，使用安全。由于1-OH-PHZ化学合成途径较少，基于微生物获得一种高产1-OH-PHZ的工程菌株具有重要意义。

发明内容