[发明专利]一种血浆中极低浓度氟哌啶醇的定量分析方法

说明书

本发明公开了一种血浆中极低浓度氟哌啶醇的定量分析方法，特点是包括以下步骤：1)样品前处理；2)以分析物浓度为横坐标，仪器响应值为纵坐标绘制标准曲线；3)液相色谱串联质谱分析条件：液相色谱柱采用C18，流动相A中乙腈和水的体积比为2∶98至8∶92，含甲酸的量0.05‑0.25％；流动相B中乙腈和水的体积比为98∶2至92∶8，含甲酸的量为0.05‑0.25％，进行梯度洗脱；质谱离子化方式为电喷雾离子化正离子模式；4)通过线性回归计算：y＝ax+b，y为分析物/内标峰面积比，b为标准曲线的截距，a为标准曲线的斜率，x为分析物的浓度，优点是准确性和灵敏度高，专属性良好，方法抗干扰能力强。

技术领域

本发明涉及一种药物分析技术领域，尤其是涉及一种血浆中极低浓度氟哌啶醇的定量分析方法。

背景技术

氟哌啶醇片是丁酰苯类抗精神分裂药，能选择性拮抗多巴胺(D2)受体，具有很强的抗精神病作用，用于治疗急、慢性各型精神分裂症、躁狂症、抽动秽语综合征。氟哌啶醇片作为小规格片剂，每片中仅有氟哌啶醇2mg。且治疗抽动秽语综合征时，该药用量为一次1～2mg(0.5-1片)，一日2-3次。按照一般成人体重60kg计算，用药一次后体内血药浓度极低。为了保证用药的安全性、有效性，防止用药过量导致的安全性问题以及用药过低导致的有效性问题，及时高效开展相关研究，考察药物在血浆样本中的浓度，进一步完善药物在体内的吸收、分布、代谢及排泄情况，检测方法的准确性、灵敏度等至关重要。

现有的氟哌啶醇片生物样本定量分析方法最低定量限为50pg/mL，该种情况下，难以对体内药物吸收、药物消除时氟哌啶醇血药浓度准确定量，即不能有效检出极低浓度血浆样品中的氟哌啶醇(浓度低于50pg/mL)。因此无法对药物在体内的吸收、分布、代谢、排泄等进行良好评估，进而无法保障临床试验的准确性。因此需要一种准确、灵敏的检测方法定量血浆中氟哌啶醇的浓度，来增加患者用药安全性和有效性评价的准确性。氟哌啶醇片作为抗精神病分裂药，在使用过程中常有合并用药以及为减少药物不良反应而采取预防用药的情况，如联合使用苯扎托品等，合并用药物对氟哌啶醇在体内的检测也存在一定的干扰，因此在临床研究中急需一种专属性良好，抗干扰能力强的氟哌啶醇定量分析方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种准确性和灵敏度高，专属性良好，方法抗干扰能力强，稳定可靠且检测周期短的血浆中极低浓度氟哌啶醇的定量分析方法。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种血浆中极低浓度氟哌啶醇的定量分析方法，包括以下步骤：

(1)样品前处理

取血浆样品50μL于96孔板中，加入50μL浓度为200ng/mL的氟哌啶醇-d4内标溶液至血浆样品中，加入400μL含体积百分数0.05-0.3％甲酸的乙腈溶液，涡旋混匀后离心；移取200μL上清液至新的96孔板中，加入200μL的含体积百分数0.05-0.3％甲酸的水溶液，封板后涡旋再离心，取上清液进样；

(2)标准曲线制作

用氟哌啶醇标准品配制标准工作液，采用标准工作液和加入人K2EDTA的空白血浆配制标准曲线样品，按步骤(1)前处理方法处理后进样，以分析物浓度为横坐标，仪器响应值(响应值为分析物/内标峰面积比)为纵坐标，绘制标准曲线；

(3)液相色谱串联质谱HPLC-MS/MS分析条件