[发明专利]一种白藜芦醇的生物萃取方法

说明书

本发明提供了一种白藜芦醇的生物萃取方法，以新鲜的虎杖根为原料，进行白藜芦醇的生物萃取，原料中虎杖苷、白藜芦醇含量高，为白藜芦醇的大量制备提供了一个新思路。具体来说，本发明先将新鲜的虎杖根洗净、粉碎后加入去离子水中，搅拌打浆，高压均质，利用溶菌酶第一次酶解，得到虎杖根浆液；然后将虎杖根浆液制成发酵培养基，接种产酸菌，发酵15～18小时，加入木聚糖酶和β‑葡聚糖酶，进行第二次酶解，电子束辐照5～8分钟，继续发酵10～12小时，离心，得到发酵液；最后利用含碳纳米管的磁性离子液体萃取发酵液，即得白藜芦醇，该方法生产周期短，提取率高，所得白藜芦醇的纯度高。

技术领域

本发明涉及天然药物提取技术领域，特别地，涉及一种白藜芦醇的生物萃取方法。

背景技术

白藜芦醇的化学名为3,5,4’-芪三酚(三羟基1,2-二苯基乙烯)，具有顺、反两种结构，反式结构更为稳定，是一种生物性很强的天然多酚类物质。研究表明，Res能抑制肿瘤、抗氧化、抗自由基、抗血栓、抗过敏、抗动脉粥样硬化，对冠心病、缺血性心脏病、高血脂症等具有防治作用，白藜芦醇已被列为抗心血管、抗癌最有前途的药物之一，现已广泛应用于食品添加剂、保健品、化妆品等行业。

白藜芦醇存在于葡萄皮、蓼科植物虎杖的根和根茎、豆科花生的红衣和仁等植物中，其中，虎杖中白藜芦醇含量最高。

白藜芦醇在虎杖中主要以苷的形式存在，少量以游离的白藜芦醇并存。研究发现，白藜芦醇的糖苷衍生物虎杖苷和白藜芦醇具有相似的药理作用，且在虎杖中的含量大大超过白藜芦醇，但它的生物活性和价值却远不如白藜芦醇。因此，将虎杖苷转化成白藜芦醇为白藜芦醇的大量制备提供了可能性。

现有的白藜芦醇生产工艺一般都是先通过微生物发酵将虎杖苷转化为白藜芦醇再进行提取，由于微生物转化白藜芦醇的同时也产生了较多的糖类物质，因而物料的粘度增强，提取过程中溶剂的穿透性变差，造成提取率低和提取时间长；提取完白藜芦醇后的纯化大多需要使用三氯甲烷，并且是两次上柱，生产周期长，损耗大，成本高。

发明内容

本发明目的在于提供一种白藜芦醇的生物萃取方法，以解决生产周期长、提取率低、纯度低等技术问题。

为实现上述目的，本发明提供了一种白藜芦醇的生物萃取方法，具体步骤如下：

(1)先将新鲜的虎杖根洗净、粉碎后加入去离子水中，搅拌打浆，高压均质，利用溶菌酶第一次酶解，得到虎杖根浆液；

(2)然后将虎杖根浆液制成发酵培养基，接种产酸菌，发酵15～18小时，加入木聚糖酶和β-葡聚糖酶，进行第二次酶解，电子束辐照5～8分钟，继续发酵10～12小时，离心，得到发酵液；

(3)最后利用含碳纳米管的磁性离子液体萃取发酵液，即得白藜芦醇；

其中，所述磁性离子液体是以4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物、1,1,3,3-四甲基胍、溴乙烷为原料制成；所述含碳纳米管的磁性离子液体是将碳纳米管进行表面氨基化改性后，均匀分散于磁性离子液体中而得。

优选的，步骤(1)中，将新鲜的虎杖根洗净后粉碎至30～60目。

优选的，步骤(1)中，去离子水的用量为新鲜虎杖根重量的4～6倍。

优选的，步骤(1)中，利用高压微射流均质机实现高压均质，具体工艺条件为：压力100～120MPa，温度40～43℃，时间5～8分钟。

优选的，步骤(1)中，第一次酶解的工艺条件为：溶菌酶的用量为新鲜虎杖根重量的0.03～0.04倍，35～45℃酶解4～6小时。

优选的，步骤(2)中，以重量份计，所述发酵培养基包含：虎杖根浆液1份，牛肉膏8～10份，蛋白胨20～22份，氯化钠7～10份，无菌水100份。