[发明专利]一种葡萄糖检测试剂磁性纳米微球及其制备方法

权利要求书

1.一种葡萄糖检测试剂磁性纳米微球，其特征在于，包括：按重量计配方包括：

明胶26-42份，季铵化壳聚糖18-34份，卵磷脂2-6份，海藻酸钠16-28份，磁性纳米粒子0.6-1.2份，无水乙醇80-160份，浓度为7000-8000U/L的葡萄糖氧化酶20-30份，浓度为300-400U/L的脱氢酶10-20份，浓度为6-8.0mmol/L的邻联苯甲胺10-20份，表面活性剂9-15份，100-140mmol/L Tris缓冲液60-120份。

2.根据权利要求1所述的一种葡萄糖检测试剂磁性纳米微球，其特征在于，所述表面活性剂包括：吐温80，吐温20。

3.根据权利要求1所述的一种葡萄糖检测试剂磁性纳米微球，其特征在于，所述磁性纳米粒子包括：氧化铁纳米粒子，超顺磁氧化铁纳米颗粒。

4.一种葡萄糖检测试剂磁性纳米微球的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

按照配方准备材料；

配方按重量计包括：明胶26-42份，季铵化壳聚糖18-34份，卵磷脂2-6份，海藻酸钠16-28份，无水乙醇80-160份，浓度为7000-8000U/L的葡萄糖氧化酶20-30份，浓度为300-400U/L的脱氢酶10-20份，浓度为6-8.0mmol/L的邻联苯甲胺10-20份，表面活性剂9-15份，浓度为100-140mmol/L Tris缓冲液60-120份；

制作葡萄糖氧化酶磁性纳米微球：

步骤1，微球聚合物壳层基材：

将明胶、季铵化壳聚糖、卵磷脂、海藻酸钠、磁性纳米粒子、无水乙醇搅拌，脱泡，熟化后得到聚合物壳层基材；

步骤2，微球聚合物芯层溶液：

将葡萄糖氧化酶和3-5份表面活性剂，20-60份100-140mmol/L Tris缓冲液混合；

步骤3，使用同轴式喷注器将微球聚合物壳层基材包裹微球聚合物芯层溶液得到葡萄糖氧化酶磁性纳米微球；

制作脱氢酶磁性纳米微球：

步骤a，微球聚合物壳层基材：

将明胶、季铵化壳聚糖、卵磷脂、海藻酸钠、磁性纳米粒子、无水乙醇搅拌，脱泡，熟化后得到聚合物壳层基材；

步骤b，微球聚合物芯层溶液：

将脱氢酶和3-5份表面活性剂，20-60份100-140mmol/L Tris缓冲液混合；

步骤c，使用同轴式喷注器将微球聚合物壳层基材包裹微球聚合物芯层溶液得到脱氢酶氧化酶磁性纳米微球；

制作邻联苯甲胺磁性纳米微球：

步骤A，

将明胶、季铵化壳聚糖、卵磷脂、海藻酸钠、磁性纳米粒子、无水乙醇搅拌，脱泡，熟化后得到聚合物壳层基材；

步骤B，微球聚合物芯层溶液：

将邻联苯甲胺和3-5份表面活性剂，20-60份100-140mmol/L Tris缓冲液混合；

步骤C，使用同轴式喷注器将微球聚合物壳层基材包裹微球聚合物芯层溶液得到邻联苯甲胺氧化酶磁性纳米微球；

将葡萄糖氧化酶磁性纳米微球，脱氢酶磁性纳米微球，邻联苯甲胺磁性纳米微球按照4-6:2-4:4-6的体积比混合得到葡萄糖检测试剂磁性纳米微球。

5.根据权利要求4所述的一种葡萄糖检测试剂磁性纳米微球的制备方法，其特征在于，

微球聚合物壳层基材的具体制备方法为：将明胶溶解在80-90摄氏度的水中搅拌，将季铵化壳聚糖加入明胶溶液中搅拌，再搅拌加入卵磷脂，在搅拌加入海藻酸钠，再加入磁性纳米粒子搅拌均匀，最后加入无水乙醇，在温度20～70℃的温度下搅拌溶解，在0.08～0.10MPa的真空度下脱泡，熟化，得到聚合物壳层基材。

6.根据权利要求4所述的一种葡萄糖检测试剂磁性纳米微球的制备方法，其特征在于，所述葡萄糖氧化酶磁性纳米微球，脱氢酶磁性纳米微球，邻联苯甲胺磁性纳米微球按照5:3:5的体积比混合得到葡萄糖检测试剂磁性纳米微球。

7.根据权利要求4所述的一种葡萄糖检测试剂磁性纳米微球的制备方法，其特征在于，使用同轴式喷注器将微球聚合物壳层基材包裹微球聚合物芯层溶液的方法包括：将微球聚合物壳层基材、微球聚合物芯层溶液放入同轴式喷注器内，放置微球聚合物壳层基材的针头内径为1.2-1.4mm，溶液流速为7-12ml/h，放置微球聚合物芯层溶液的针头内径为0.5～0.7mm，溶液流速为1.2～2.8ml/h，喷注电压为18-26kv，喷涂距离为3-12cm；喷注完成后在固化浴中完成固化得到纳米微球。