[发明专利]检测大肠埃希菌和/或志贺菌的底物组合、检测试剂及检测试剂盒

权利要求书

1.检测大肠埃希菌和/或志贺菌的底物组合，其特征在于，包括第一底物组合、第二底物组合、第三底物组合和第四底物组合；

所述第一底物组合包括：0.8%~1.2%甘露醇、1.4%~1.7%酸碱指示剂和缓冲体系，pH值7.2~7.4；

所述第二底物组合包括：0.8%~1.2%糖苷或其与酚类结合的化合物和缓冲体系，pH值7.0~8.0；

所述第三底物组合包括：0.8%~1.2%甜味剂、1.4%-1.7%酸碱指示剂和缓冲体系，pH值7.2~7.4；

所述第四底物组合包括：0.5%~1%甘油、1.4%-1.7%酸碱指示剂和缓冲体系，pH值7.2~7.4；

所述第一底物组合、所述第三底物组合或所述第四底物组合中的所述酸碱指示剂包括苯酚红、苯酚红衍生物或溴甲酚紫中的一种或两者以上的组合物；

所述苯酚红衍生物包括苯酚红钠；

所述第二底物组合中的所述糖苷包括2-硝基苯β-D-半乳吡喃糖苷（ONPG）、β-D-半乳吡喃糖苷或α-D-半乳吡喃糖苷中的一种或两者以上的组合物；

所述酚类包括但不仅限于苯酚、硝基苯酚、萘酚、吲哚酚中的一种或两者以上的组合物；

所述第三底物组合中所述甜味剂包括：山梨醇、乳糖、木糖中的一种或两者以上的组合物；

所述缓冲体系包括但不限于：磷酸盐缓冲液或Tris缓冲液中的一种或其组合。

2.如权利要求1所述的底物组合在制备检测大肠埃希菌和/或志贺菌的试剂中的应用。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述志贺菌包括鲍氏志贺菌、宋内志贺菌、福氏志贺菌、痢疾志贺菌中的至少一种。

4.试剂，其特征在于，包括如权利要求1所述的底物组合以及可接受的助剂。

5.试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1所述的底物组合以及可接受的助剂或载体；所述载体包括板卡。

6.大肠埃希菌或志贺菌的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：获得如权利要求1所述底物组合；

步骤2：取待测菌，获得2.5~3麦氏的菌悬液；所述待测菌为大肠埃希菌或志贺菌；

步骤3：取步骤1制得的所述底物组合与步骤2制得的菌悬液按照体积比（8~12）：（80~120）混合，35~37℃孵育1~2h；

步骤4：根据步骤3孵育后的显色结果，分别获得所述第一底物组合、所述第二底物组合、所述第三底物组合和所述第四底物组合的阴性或阳性的判读结果；综合所述判读结果，获得检测结果；

所述阴性或阳性的判读标准为：

所述第一底物组合、所述第三底物组合或所述第四底物组合中，

当所述酸碱指示剂为苯酚红或苯酚红衍生物时，显色结果为红色变成黄色，即判读阳性，不变色为阴性；

当所述酸碱指示剂为溴甲酚紫时，显色结果为紫色变成黄色，即判读阳性，不变色为阴性；

所述第二底物组合中，显色结果为无色变成黄色，即判读阳性，不变色为阴性；

综合所述判读结果，获得检测结果具体为：

其中，“+”表示阳性；“-”表示阴性；“v”表示“+/-”。