[发明专利]一种单组份TMB显色液,其制备方法及试剂盒有效

专利信息
申请号: 202011044413.1 申请日: 2020-09-28
公开(公告)号: CN112280824B 公开(公告)日: 2022-07-19
发明(设计)人: 黄思斯;武子函;季志华;张雨;刘伯华;杨鹏 申请(专利权)人: 北京森康维特生物技术研究所
主分类号: C12Q1/28 分类号: C12Q1/28;G01N33/58;G01N33/543
代理公司: 北京丰浩知识产权代理事务所(普通合伙) 11781 代理人: 李学康
地址: 101499 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 单组份 tmb 显色 制备 方法 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种单组份TMB显色液,该显色液由TMB、过氧化氢、缓冲液、pH调节剂、聚乙烯吡咯烷酮K30、二甲基亚砜、1,2,6-己三醇、硫代硫酸钠、乙二胺四乙酸二钠和稳定剂组成,所述稳定剂为甘油和海藻;

每1000mL所述显色液中含有TMB 0.4 ~ 0.6 g、过氧化氢400 ~ 600 μL、聚乙烯吡咯烷酮K30 12 ~ 16 g、二甲基亚砜8 ~ 12 mL和1,2,6-己三醇 4 ~ 6 g、硫代硫酸钠2.5 ~ 3.5mg、乙二胺四乙酸二钠0.2 ~ 0.3g;

每1000 mL所述显色液中含有甘油4.5 ~ 5.5 mL,海藻糖9 ~ 10 g。

2.根据权利要求1所述的显色液,其特征在于,每1000mL所述显色液中含有TMB 0.5 g、过氧化氢500μL、聚乙烯吡咯烷酮K30 14 g、二甲基亚砜10 mL和1,2,6-己三醇 5 g。

3.根据权利要求1所述的显色液,其特征在于,所述显色液的pH值为3.5 ~ 3.8。

4.根据权利要求1所述的显色液,其特征在于,每1000 mL所述显色液中含有硫代硫酸钠3mg。

5.根据权利要求1所述的显色液,其特征在于,每1000 mL所述显色液中含有乙二胺四乙酸二钠0.24 g。

6.根据权利要求1所述的显色液,其特征在于, 每1000 mL所述显色液中含有甘油5mL;每1000 mL所述显色液中含有海藻糖9.46g。

7.根据权利要求1所述的显色液,其特征在于,所述缓冲液采用醋酸-柠檬酸缓冲液。

8.根据权利要求7所述的显色液,其特征在于,每1000 mL所述显色液中含有柠檬酸0.95 ~ 1.05 g和乙酸钠 8 ~ 8.4 g。

9.根据权利要求7所述的显色液,其特征在于,每1000 mL所述显色液中含有柠檬酸1g和乙酸钠 8.2 g。

10.根据权利要求1所述的显色液,其特征在于,所述pH调节剂选自摩尔浓度为6 ~12mol/L的HCl。

11.根据权利要求10所述的显色液,其特征在于,每1000 mL所述显色液中含有HCl 4 ~9 mL。

12.一种如权利要求1~11任一项所述显色液的制备方法,其特征在于,至少包括以下步骤:

S1、按比例量取pH调节剂加入水中,得到pH调节剂水溶液;按比例称取TMB溶于二甲基亚砜中,得到TMB溶液;

S2、在所述pH调节剂水溶液中按比例加入聚乙烯吡咯烷酮K30,然后加入所述TMB溶液;

S3、再按比例加入1,2,6-己三醇和缓冲液成分,调节pH值,加入过氧化氢,定容,过滤,即得所述显色液。

13.根据权利要求12所述的制备方法,其特征在于,所述pH调节剂水溶液的pH值为1.69。

14.根据权利要求12所述的制备方法,其特征在于,按比例加入硫代硫酸钠、1,2,6-己三醇、柠檬酸、甘油、海藻糖和乙二胺四乙酸二钠,用乙酸钠溶液调节pH值到3.6后再加入过氧化氢。

15.根据权利要求14所述的制备方法,其特征在于,所述乙酸钠溶液的浓度8 ~ 8.4 g/L。

16.根据权利要求14所述的制备方法,其特征在于,所述乙酸钠溶液的浓度8.2 g/L。

17.根据权利要求12所述的制备方法,其特征在于,所述过滤为采用0.45 μm的滤器进行过滤。

18.一种酶联免疫试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中含有权利要求1 ~ 11任一项所述的显色液。

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