[发明专利]一种葡萄糖异构化过程中果糖含量的分析方法及其应用

权利要求书

1.一种葡萄糖异构化过程中果糖含量的分析方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，建立葡萄糖异构化过程中果糖含量的快速分析模型；

步骤2，采集待测样品的拉曼光谱；

步骤3，计算待测样品的拉曼光谱与所述快速分析模型中所用参比样本光谱的系列夹角值，再求取系列夹角值的方差值D；

步骤4，将所述方差值D的数值代入步骤1的快速分析模型中即可得到待测样品的果糖含量。

2.如权利要求1所述的一种葡萄糖异构化过程中果糖含量的分析方法，其特征在于，步骤1中所述快速分析模型是通过以下步骤建立的：

步骤1)，葡萄糖异构化：将质量分数为40％～55％的葡萄糖浆与葡萄糖异构酶反应一段时间后，得到反应液；

步骤2)，测定步骤1)得到的反应液中果糖质量分数，以此作为基液，按一定配比添加果糖(AR)或30％质量分数的葡萄糖溶液，配制得到一系列果葡糖浆样本；各样本果糖含量间隔3％～5％，各样本果糖质量分数在3％～35％的范围内，样本数为7～10个；

步骤3)，采集各样本的拉曼光谱，每个样本采集三次取平均值；

步骤4)，采用荧光褪色差分法，选择一阶或2阶求导，对步骤3)所得样本的拉曼光谱进行降噪处理；然后选择果糖含量25％～35％的样本为参比样本，计算各样本降噪处理后的拉曼光谱与参比样本光谱系列夹角的方差值D；

步骤5)，以果糖质量分数为横坐标，方差值D为纵坐标，得到果糖含量与角度方差值的关联方程，即为所述葡萄糖异构化过程中果糖含量的快速分析模型。

3.如权利要求1或2所述的一种葡萄糖异构化过程中果糖含量的分析方法，其特征在于，所述方差值D是通过以下方法得到的：

确定移动窗口宽度，从最小波数点向波数点增大方向每移动一次窗口，计算得到一个各样本光谱与参比样本光谱的夹角，待窗口移动到最大波段波数，得到系列夹角值，然后求取系列夹角值的方差值D。

4.如权利要求3所述的一种葡萄糖异构化过程中果糖含量的分析方法，其特征在于，所述移动窗口宽度为波段波数的1/30～1/15，所述波段为样本拉曼光谱响应特征波段。

5.如权利要求2所述的一种葡萄糖异构化过程中果糖含量的分析方法，其特征在于，步骤1)中所述葡萄糖异构酶的用量为每克葡萄糖浆5mg～12.5mg。

6.如权利要求2所述的一种葡萄糖异构化过程中果糖含量的分析方法，其特征在于，步骤1)中所述酶异构化条件为pH＝6～9，温度50℃～65℃，所述反应时间为24h。

7.如权利要求2所述的一种葡萄糖异构化过程中果糖含量的分析方法，其特征在于，步骤2)中，采用间苯二酚-分光光度法或高效液相色谱分析法测定得到的反应液中果糖质量分数。

8.如权利要求2所述的一种葡萄糖异构化过程中果糖含量的分析方法，其特征在于，步骤3)中，采集拉曼光谱的积分时间为9s，平滑点数为0，激发波长为532nm，功率等级为9，拉曼位移范围为150cm^-1～3500cm^-1。

9.如权利要求1-8任一所述的一种葡萄糖异构化过程中果糖含量的分析方法在监测葡萄糖异构化过程中的应用，其特征在于，根据所述方差值D的数值变化实现对葡萄糖浆异构化过程的监控。

10.一种实时监控葡萄糖异构化过程状态的方法，其特征在于，配制含一定量葡萄糖的溶液(g1)，分别计算不同时间下，反应液拉曼光谱与g1溶液拉曼光谱的夹角值方差值EE*，以EE*值为纵坐标，反应时间为横坐标，作反应趋势曲线，通过夹角值EE*增大的趋势判断葡萄糖异构化过程，夹角值EE*增大的趋势越趋于平缓说明反应越完全，反之，反应不完全。