[发明专利]一种核酸适配体及其在检测雌二醇中的应用

权利要求书

1.一种核酸适配体，为如下A1)-A9)中任一种：

A1)序列1所示的单链DNA分子；

A2)序列2所示的单链DNA分子；

A3)序列3所示的单链DNA分子；

A4)将A1)所示的核酸适配体删除或增加一个或几个核苷酸，得到与所述核酸适配体具有相同功能的核酸适配体的衍生物；

A5)将A1)或A4)所示的核酸适配体进行核苷酸取代或修饰，得到与所述核酸适配体具有相同功能的核酸适体的衍生物；

A6)将A2)所示的核酸适配体删除或增加一个或几个核苷酸，得到与所述核酸适配体具有相同功能的核酸适配体的衍生物；

A7)将A2)或A6)所示的核酸适配体进行核苷酸取代或修饰，得到与所述核酸适配体具有相同功能的核酸适体的衍生物；

A8)将A3)所示的核酸适配体删除或增加一个或几个核苷酸，得到与所述核酸适配体具有相同功能的核酸适配体的衍生物；

A9)将A3)或A8)所示的核酸适配体进行核苷酸取代或修饰，得到与所述核酸适配体具有相同功能的核酸适体的衍生物。

2.根据权利要求1所述的核酸适配体，其特征在于：所述A5)、A7)和A9)中，所述修饰为磷酸化、甲基化、氨基化、巯基化或同位素化。

3.权利要求1或2所述的核酸适配体在下述B1)-B4)至少一种中的应用：

B1)在结合雌二醇中的应用；

B2)在定性和/或定量检测雌二醇中的应用；

B3)在制备用于检测雌二醇的试剂盒中的应用；

B4)在制备用于检测雌二醇的生物传感器中的应用。

4.一种产品，其包括权利要求1或2所述的核酸适配体。

5.根据权利要求4所述的产品，其特征在于：

所述产品具有如下C1)-C3)中至少一种用途：

C1)结合雌二醇；

C2)检测待测样品中是否含有雌二醇；

C3)测定待测样品中雌二醇的含量。

6.根据权利要求5所述的产品，其特征在于：

所述产品为试剂盒或生物传感器；

所述生物传感器为基于纳米金比色发或荧光法或电化学法制备的检测雌二醇的生物传感器；

所述产品中，所述待测样品为液态样品或固态样品。

7.一种基于纳米金比色法检测待测样品中是否含有雌二醇的方法，包括下述步骤：

1)将权利要求1或2所述核酸适配体与待测样品混匀后，进行反应；

2)向步骤1)反应体系中加入纳米金溶液孵育；

3)向步骤2)体系中加入盐溶液，得到最终体系，5min后观察颜色变化；

将步骤1)中所述待测样品替换为等量的水，重复上述步骤1)-3)的操作，得到对照体系；

若体系的颜色由红色变成蓝色或灰色，则待测样品中含有雌二醇或候选含有雌二醇；

若最终体系的颜色与对照体系的颜色相比无变化，则待测样品中不含有雌二醇或候选不含有雌二醇。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：

所述步骤1)中，所述反应的条件为：15-25℃反应10min-20min；

所述步骤2)中，所述纳米金的粒径为13nm；所述孵育的时间为10min；

所述步骤3)中，所述最终体系的组成如下：25μL核酸适配体溶液、25μL待测样品、50μL纳米金溶液、10μL NaCl溶液；

所述核酸适配体溶液的浓度为3μM-4μM；

所述核酸适配体为序列1所示的单链DNA分子，其最优浓度为3μM；

所述核酸适配体为序列2或3所示的单链DNA分子，其最优浓度为4μM。

所述纳米金溶液是由100mL 1mM四氯金酸溶液经2mL 194mM的柠檬酸三钠溶液氧化还原所得；

所述NaCl溶液的浓度为0.6M。