[发明专利]一种低聚半乳糖生产专用酶及其制备与应用

权利要求书

1.一种乳糖酶，其特征在于，所述乳糖酶氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.18所示。

2.权利要求1所述的一种乳糖酶，其特征在于，所述乳糖酶编码基因如序列表SEQ IDNO.17所示。

3.含有权利要求2所述乳糖酶编码基因的重组载体或重组菌株。

4.如权利要求3所述的重组菌株，其特征在于，所述重组菌株采用的表达宿主为突变株BCBT0529，是在地衣芽胞杆菌CBB3008，编号CCTCC NO.M208236的基因组上敲除aprE，vpr，wpr，lacR，lacA，lacA2，yesZ基因所得；

aprE，vpr，wpr，lacR，lacA，lacA2，yesZ基因的GenBank登录号分别为：MT885340、MT885341、MT885342、MT885336、MT885337、MT885338、MT885339。

5.权利要求3所述重组菌株发酵生产乳糖酶的方法，其特征在于，摇瓶发酵生产乳糖酶：接种重组菌至摇瓶培养基，30～45℃、120-270r/min下培养2～3天；

摇瓶培养基组成：酵母膏0.5～1.5％，蛋白胨1.2～3.6％，葡萄糖8～20％；pH 7.0。

6.权利要求3所述重组菌株发酵生产乳糖酶的方法，其特征在于，发酵罐发酵生产乳糖酶：将菌种按接种量为5％-10％接入发酵罐培养基；发酵过程中采用发酵温度33～45℃，控制溶氧为0.1％～20％，pH为6.0～7.8，流加30％～60％麦芽糖浆并维持还原糖含量在0.1％-5％；发酵持续90～120h，发酵终点控制为发酵酶活增加值小于5-20U/(mL·h)；

发酵罐培养基组成为：麦芽糖浆1％～5％，棉籽粉0％～5％，玉米浆0％-4％，豆饼粉0.5～5％，硫酸铵0.1～5％，pH 6.0～8.0。

7.权利要求5或6所述重组菌株发酵生产乳糖酶的方法，其特征在于，发酵结束后，经板框过滤除去菌体，再经超滤系统过滤后获得酶液。

8.权利要求3所述重组载体或重组菌株在生产乳糖酶中的应用。

9.权利要求1或2所述乳糖酶在生产低聚半乳糖中的应用。