[发明专利]一种苹果中丙硫菌唑及其代谢物硫酮菌唑残留量的测定方法

权利要求书

1.一种苹果中丙硫菌唑及其代谢物硫酮菌唑残留量的测定方法，其特征在于：将冷藏保存的待测苹果样品去柄并全果避光切块后，加干冰粉碎，获得试样；在试样中依次加入抗坏血酸水溶液、甲酸乙腈溶液和氯化钠并涡旋振荡萃取，离心，所得上清液净化后，稀释并进行UHPLC-MS/MS分析，从而确定样品中丙硫菌唑及其代谢物硫酮菌唑的残留量；具体包括如下步骤：

步骤1、制样

将冷藏保存的待测苹果样品取出并去柄后，将全果避光快速切块混匀放入粉碎机，加入适量干冰全部粉碎，获得试样；

步骤2、萃取

称取5g试样，置于具塞棕色离心管中，加入10mL浓度为15μg/mL的抗坏血酸水溶液并涡旋混匀，再加入10mL体积浓度为1％的甲酸乙腈溶液，涡旋振荡提取2～3min；之后向离心管中加入5g氯化钠，涡旋振荡1min后，以不低于4000r/min的转速4℃离心，取上清液待净化；

步骤3、净化

取1mL步骤2所得上清液放入装有50mg C₁₈、50mg PSA和150mg无水硫酸镁的离心管中，涡旋振荡，然后以不低于8000r/min的转速4℃离心，取上清液待检测；

步骤4、检测

取步骤3所得上清液用纯水稀释1倍，所得稀释液过0.22μm有机系滤膜至棕色样品瓶，经UHPLC-MS/MS分析，从而确定待测样品中丙硫菌唑及其代谢物硫酮菌唑的残留量。

2.根据权利要求1所述的一种苹果中丙硫菌唑及其代谢物硫酮菌唑残留量的测定方法，其特征在于：步骤1中，所述冷藏保存的待测苹果样品是在2-4℃冰箱中冷藏2h以上的样品。

3.根据权利要求1所述的一种苹果中丙硫菌唑及其代谢物硫酮菌唑残留量的测定方法，其特征在于：步骤3中，所述涡旋振荡的时间为1min，所述离心的时间为5min。

4.根据权利要求1所述的一种苹果中丙硫菌唑及其代谢物硫酮菌唑残留量的测定方法，其特征在于：步骤4中，UHPLC-MS/MS分析的条件设定为：

(1)液相色谱条件：C₁₈色谱柱；流动相：A相为纯水，B相为乙腈；流速：0.4mL/min；柱温：35℃；进样量10μL；

(2)梯度洗脱程序，按照体积分数计：0min，20％B；0.5min，20％B；2.0min，60％B；4.0min，60％B；4.5min，90％B；6.5min，90％B；7min，20％B；11min，20％B；

(3)质谱条件：离子源为电喷雾电离源，正负离子切换扫描模式，鞘气温度320℃，鞘气流量12L/min，雾化气压力40psi，干燥气温度320℃，干燥气流速6L/min，毛细管电压正模式3000V、负模式3500V，MRM多反应监测模式。

5.根据权利要求4所述的一种苹果中丙硫菌唑及其代谢物硫酮菌唑残留量的测定方法，其特征在于：步骤4中，多反应监测模式的定性离子对、定量离子对、驻留时间、碎裂电压FP及碰撞气电压CE见表1，表中a为定量离子对、b为辅助定性离子对：

表1 2种农药多反应监测模式参数