[发明专利]一种鸡蛋中金刚乙胺残留量的LC-MS/MS测定方法

权利要求书

1.一种鸡蛋中金刚乙胺残留量的LC-MS/MS测定方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)提取：将鸡蛋样品加入内标物后均质，再加入0.5-5％乙酸乙腈溶液，涡旋，离心，取上清，再加入正己烷，涡旋，离心，弃去正己烷层，收集提取液；

(2)净化：将阳离子固相萃取柱用甲醇活化，水平衡，然后将提取液上柱，控制流速在2-3滴/s，依次用1-3％盐酸水溶液、甲醇淋洗，抽干后用3-8％氨水甲醇溶液洗脱，收集洗脱液，氮气吹干后用初始流动相复溶，涡旋后过0.22μm滤膜，得供试样品溶液；

(3)标准品溶液的制备：将适量金刚乙胺标准品和内标物用初始流动相稀释，配制成金刚乙胺分别为1、2、5、10μg/L、内标物浓度为2μg/L的标准品溶液；

(4)测定：将供试样品溶液和标准品溶液在相同条件下分别进行LC-MS/MS测定，测定条件如下：

液相色谱条件：

色谱柱：Waters XBridge C18 Column(2.1×150mm，3.5μm)

流动相：A相为0.1％甲酸水溶液；B相为甲醇溶液

流速：0.3mL/min

进样量：5μL

梯度洗脱：梯度洗脱程序见下表：

时间/min	A/％	B/％
0	90	10
1	90	10
5	10	90
6	90	10
7	90	10

质谱条件：

离子源：ESI

雾化气流速：3L/min

加热气流速：10L/min

接口温度：350℃

DL温度：250℃

加热模块温度：400℃

干燥气流速：10L/min

检测模式：多反应监测(MRM)

氩气：17kPa

定性离子对、定量离子对及锥孔电压和碰撞能量见下表：

(5)计算：以标准品溶液特征离子质量色谱峰面积为纵坐标，标准品溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线，采用内标法，将测得的供试样品溶液中金刚乙胺的色谱峰面积代入标准曲线，得到供试样品溶液中金刚乙胺含量，最后根据供试样品溶液的含量计算得到鸡蛋中金刚乙胺残留量。