[发明专利]一种细胞工厂的传代和细胞收获管路系统及其应用

权利要求书

1.一种细胞工厂的传代和细胞收获管路系统，其特征在于包括一条由多段管路和多个三通开关(3)间隔相连构成的主管路，主管路上的各三通开关(3)通过管路分别连接：若干个待处理细胞工厂(2)、废液罐(4)、清洗液罐(6)、消化液罐(7)、终止液罐(8)、细胞悬液罐(9)和若干个待接种细胞工厂(10)；其中各罐子上均接有空气滤器(5)，方便与压力真空泵连接，形成负压或正压为液体流动提供动力。

2.根据权利要求1所述的管路系统，其特征在于，所述管路为任何无毒的管路，包括但不局限于医用硅胶管、塑料管。

3.根据权利要求1所述的管路系统，其特征在于，所述待处理细胞工厂(2)和待接种细胞工厂(10)的规格和数量可根据实际情况设置，细胞工厂可以是1层、2层、4层、10层或40层；待处理细胞工厂(2)数量为1-20个，待接种细胞工厂(10)数量为0-20个。

4.根据权利要求1所述的管路系统，其特征在于，所述与主管路连接的废液罐(4)、清洗液罐(6)、消化液罐(7)、终止液罐(8)、细胞悬液罐(9)的顺序自由排放，方便操作即可。

5.根据权利要求1所述的管路系统，其特征在于，所述主管路上的三通开关(3)通过管路和接头(1)再与细胞工厂连接；其中接头(1)是任何可以与细胞工厂对接的接头，包括但不局限于PC接头、快接头。

6.根据权利要求1所述的管路系统，其特征在于，所述废液罐(4)、清洗液罐(6)、消化液罐(7)、终止液罐(8)、细胞悬液罐(9)可根据生产规模及实际情况选择不同材质和规格，包括但不局限于不同规格的玻璃丝口分装瓶、塑料储液罐。

7.根据权利要求1所述的管路系统，其特征在于，所述三通开关(3)调节液体流向，包括但不局限于“T”或“Y”型。

8.一种使用权利要求1-7任一所述管路系统进行细胞传代的方法：其特征在于包括以下步骤：

a.连接：①将所述管路系统高压灭菌后与待处理细胞工厂(2)、废液罐(4)、清洗液罐(6)、消化液罐(7)、终止液罐(8)、细胞悬液罐(9)和若干个待接种细胞工厂(10)连接；②调节各三通开关(3)的方向：除连接主管路两个末端细胞工厂的两个三通开关(3)保持细胞工厂和主管路两个方向相通外，连接其他细胞工厂的三通开关(3)均保持三个方向全通；连接各罐子的三通开关(3)保持与两侧主管路连通，与罐子相连的管路封闭；

b.收细胞上清液：①调节与废液罐(4)相连的三通开关方向，使废液罐(4)相连的管路与待处理细胞工厂(2)同侧的主管路相通，封闭另外一侧的主管路；②将压力真空泵连接废液罐(4)上的空气滤器(5)，负压将待处理细胞工厂(2)的上清液泵入废液罐(4)；③将与废液罐(4)相连的三通开(3)关调回原始状态；

c.洗涤细胞：①调节与清洗液罐(6)相连的三通开关(3)方向，使清洗液罐(6)相连的管路与待处理细胞工厂(2)同侧的主管路相通，封闭另外一侧的主管路；②将压力真空泵连接清洗液罐(6)上的空气滤器(5)，正压将清洗液泵入待处理细胞工厂(2)；浸泡后，负压将待处理细胞工厂(2)中的清洗液泵回清洗液罐(6)；③将与清洗液罐(6)相连的三通开关(3)调回原始状态；

d.消化细胞：①调节与消化液罐(7)相连的三通开关(3)方向，使消化液罐(7)相连的管路与待处理细胞工厂(2)同侧的主管路相通，封闭另外一侧的主管路；②将压力真空泵连接消化液罐(7)上的空气滤器(5)，正压将消化液泵入待处理细胞工厂(2)，浸泡适当时间后，负压将待处理细胞工厂(2)中的消化液泵回消化液罐(7)；③将与消化液罐(7)相连的三通开关(3)调回原始状态；

e.终止消化：①调节与终止液罐(8)相连的三通开关(3)方向，使终止液罐(8)相连的管路与待处理细胞工厂(2)同侧的主管路相通，封闭另外一侧的主管路；②将压力真空泵连接终止液罐(8)上的空气滤器(5)，正压将终止液泵入待处理细胞工厂(2)，震摇使细胞脱落；③将与终止液罐(8)相连的三通开关调回原始状态；

f.回收细胞悬液：①调节与细胞悬液罐(9)相连的三通开关(3)方向，使细胞悬液罐(9)相连的管路与待处理细胞工厂(2)同侧的主管路相通，封闭另外一侧的主管路；②将压力真空泵连接细胞悬液罐(9)上的空气滤器(5)，负压将待处理细胞工厂(2)中的细胞悬液泵入细胞悬液罐(9)；

g.传代接种：①再次调节与细胞悬液罐(9)相连的三通开关(3)，使细胞悬液罐(9)相连的管路与待接种细胞工厂(10)同侧的主管路相通，封闭另外一侧的主管路；②使用压力真空泵产生正压将细胞悬液泵入待接种细胞工厂(10)。

9.一种使用权利要求1-7任一所述管路系统进行细胞收获的方法：其特征在于主管路上不连接待接种细胞工厂(10)，其他操作按照权利要求8所述步骤完成到回收细胞悬液步骤，不进行传代接种，取下细胞悬液罐(9)即可。