[发明专利]一种液相色谱-质谱联用分析模型及其构建方法

说明书

本发明提供了一种液相色谱‑质谱联用分析模型及其构建方法，涉及中药成分鉴定领域，包括流速0.15‑0.25mL·min‑1；柱温25‑35℃；正离子喷雾电压3.0‑3.5kV；负离子喷雾电压2.3‑3.0kV；毛细管温度180‑220℃；辅助器加热温度370‑420℃，构建完成的液相色谱‑质谱联用分析模型既能保证色谱峰总面积较大，又能保证各标准品的峰面积分布均匀，进而有效为后续深度神经网络模型需要的质谱数据提供前提条件。

技术领域

本发明涉及中药成分鉴定领域，尤其涉及一种液相色谱-质谱联用分析模型及其构建方法。

背景技术

中国使用草药的历史已有几千年，在天然产物研究领域也有进行了长时间的探索。在长时间的研究工作中，天然产物的鉴定工作一直是一项艰巨的任务。而天然产物的化学成分往往十分复杂，其中有很多具有较好药效的成分往往在提取物中只占有很少的比例，而这些微量成分往往能决定着一种天然产物的用途[1]。在生活息息相关的许多领域，如环境质量、食品安全、生物医药与临床诊断，也多涉及低浓度的化合物。因此低浓度物质的检测能力，特别是在复杂背景(复杂基质)下检测低浓度化合物的能力，成为分析仪器非常重要的一个功能指标。如今，在该研究领域中最突出和最受欢迎的技术无疑是质谱法[2]。目前质谱仪即以其远优于其他分析仪器的检测能力，成为分析化学最重要的分析仪器。

质谱仪可以分为低分辨质谱和高分辨质谱，其中低分辨质谱仪包括四级杆质谱、离子阱质谱[3-4]，高分辨率质谱仪包括飞行时间质谱[5]、静电轨道阱质谱、傅里叶变换离子回旋共振质谱[6]和磁质谱。低分辨率的质谱仪结构简单小巧、质量较轻且容易清洗，但无法得到精确的质量数，扫描速度慢，灵敏度低，母离子的碎裂程度低，不利于结构解析。高分辨质谱仪分辨率高，峰分离效果好，可以得到准确的质量数，扫描速度较快，检出限低。本文将使用静电场轨道阱质谱进行数据的采集，该质谱仪具有高质量精度、高分辨率、动态范围广，可提供大范围的定性和定量分析，克服高分辨质谱仪维护难和操作复杂的缺点。

高分辨质谱(HR-MS)具有极高的检测灵敏度和特异性，可提供高分辨率和准确度的质荷比，能够获取色谱峰的准分子离子及碎片离子等丰富的结构信息，有助于色谱峰的鉴定和归属，UPLC-HR-MS已成为表征复杂天然产物的有力工具，是中药活性成分研究的最有效的分析手段之一，并被广泛应用于中医药研究。黄酮类和二苯甲酮类天然产物在结构上相似，质谱分子量接近，裂解途径相似。目前，基于UPLC-HR-MS对两类化合物的鉴别工作有较大的困难

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术中存在的不足，提供一种液相色谱-质谱联用分析模型及其构建方法。

本发明是通过以下技术方案予以实现：一种液相色谱-质谱联用分析模型，包括流速0.15-0.25mL·min-1；柱温25-35℃；正离子喷雾电压3.0-3.5kV；负离子喷雾电压2.3-3.0kV；毛细管温度180-220℃；辅助器加热温度370-420℃。

根据上述技术方案，优选地，包括流速0.2mL·min-1；柱温30℃；正离子喷雾电压3.2kV；负离子喷雾电压2.8kV；毛细管温度200℃；辅助器加热温度400℃。

一种液相色谱-质谱联用分析模型的构建方法，包括以下步骤；

(1)采用UHPLC-Q-Orbitrap MS技术，结合响应面实验设计，对多组标准品进行分析得到相关数据；

(2)并运用Xcailbur软件对步骤(1)得到的相关数据进行采集；

(3)根据色谱峰总面积、相关系数R2、标准偏差RSD进行固定相的筛选和流动相的优化、筛选；

(4)根据响应面实验设计，对流速、柱温、正离子喷雾电压、负离子喷雾电压、毛细管温度、辅助器加热温度进行优化实验。