[发明专利]一种基于PP-TGase的氧化损伤蛋白凝胶性能修复方法

权利要求书

1.一种基于PP-TGase的氧化损伤蛋白凝胶强度修复方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、提取肌原纤维蛋白，得到肌原纤维蛋白膏；

步骤2、采用磷酸盐缓冲液对肌原纤维蛋白膏进行稀释，得到肌原纤维蛋白稀释液；

步骤3、在肌原纤维蛋白稀释液中，加入脂肪氧化体系，得到的氧化反应体系；氧化反应后，得到氧化损伤肌原纤维蛋白凝胶；

步骤4、在氧化损伤肌原纤维蛋白凝胶中加入凝胶性能修复剂，混匀后反应，得到反应后的肌原纤维蛋白凝胶；其中，凝胶性能修复剂采用焦磷酸钠溶液和谷氨酰胺转氨酶；步骤4中，焦磷酸钠溶液的浓度为1-2mmol/L，谷氨酰胺转氨酶与肌原纤维蛋白底物的质量比为1:（500-550）；加入凝胶性能修复剂混匀后反应2-3h；

步骤5、将反应后的肌原纤维蛋白凝胶置于密封容器中，水浴蒸煮，冷却，得到热诱导凝胶，所述热诱导凝胶即为性能修复后的肌原纤维蛋白凝胶；步骤5中，水浴蒸煮过程，采用以1-2℃/min 的升温速度，使水浴温度从20-25℃加热至 75-80℃，并在75-80℃条件下保温10 -15min；

步骤3中，氧化反应体系中肌原纤维蛋白的浓度为30-35mg/mL；脂肪氧化体系采用脂肪氧合酶-亚油酸体系；其中，脂肪氧合酶-亚油酸体系中亚油酸的浓度为10-12mmol/L，脂肪氧合酶的浓度为3750-4000u/ml蛋白。

2.根据权利要求1所述的一种基于PP-TGase的氧化损伤蛋白凝胶强度修复方法，其特征在于，步骤1中，肌原纤维蛋白膏制备过程具体如下：

步骤11、将猪外脊肉去除脂肪及结缔组织，切条备用；

步骤12、在切条后的猪外脊肉中加入僵直液，均浆捣碎，离心，得到沉淀物；

步骤13、在步骤12的沉淀物中加入NaCl溶液，均浆搅拌，过滤，得到滤液；

步骤14，调节滤液pH至6.20-6.25，离心分离，得到沉淀，沉淀即为肌原纤维蛋白膏。

3.根据权利要求1所述的一种基于PP-TGase的氧化损伤蛋白凝胶强度修复方法，其特征在于，步骤2中，磷酸盐缓冲液的pH为6.20-6.25，磷酸盐缓冲液浓度为25-30mmol/L。

4.根据权利要求1所述的一种基于PP-TGase的氧化损伤蛋白凝胶强度修复方法，其特征在于，步骤3中，氧化反应过程采用在0-4℃环境中，反应8-12h；采用在氧化反应体系中，加入Trolox终止氧化反应；其中，Trolox的浓度为1-1.2mmol/L。

5.根据权利要求1所述的一种基于PP-TGase的氧化损伤蛋白凝胶强度修复方法，其特征在于，步骤5中，冷却过程，采用在冷水浴中，冷却30-40min后，放置于0-4℃条件下冷藏处理8-12h。

6.根据权利要求1所述的一种基于PP-TGase的氧化损伤蛋白凝胶强度修复方法，其特征在于，步骤1中，肌原纤维蛋白提取过程采用在0-4℃条件下进行。

7.根据权利要求1所述的一种基于PP-TGase的氧化损伤蛋白凝胶强度修复方法，其特征在于，步骤1中，将制备的肌原纤维蛋白膏，置于碎冰中保存备用，并在48h内使用。