[发明专利]高荧光增强效果的金银合金纳米岛状薄膜及其制备方法

权利要求书

1.一种高荧光增强效果的金银合金纳米岛状薄膜的制备方法，其特征在于，该方法包含：

(1)以丁二酸酐、二异丙基乙基胺和二甲基甲酰胺的混合溶液作为混合液A，将玻璃基底置于所述混合液A中，于25℃反应，使玻璃基底表面被羧酸修饰，得到修饰羧酸的玻璃基底；

(2)将所述修饰羧酸的玻璃基底置于四氯合金酸和氨水的混合液B中，在5～15℃下反应，待反应结束，去除表面的混合液；将玻璃基底置于NaBH₄的水溶液中，在5～15℃下反应，促使金离子还原沉积在玻璃基底上，形成晶核，去除表面的残留的金离子，得到金沉积的玻璃基底；

(3)将所述金沉积的玻璃基底置于四氯合金酸和NH₂OH的混合液C中，在20～40℃下反应，玻璃基底表面形成金纳米岛状薄膜；然后置于硝酸银、氨水、氢氧化钠和D-葡萄糖的混合液D中，在20～40℃下反应，在金纳米岛状薄膜表面形成金银合金，以在玻璃基底表面形成金银合金纳米岛状薄膜；

(4)以2-巯基乙醇、4-巯基-1-丁醇、6-巯基-1-己醇、11-巯基-1-十一醇、16-巯基十六烷基酸和乙醇的混合溶液作为混合液E，将形成金银合金纳米岛状薄膜的玻璃基底置于该混合液E中，室温下反应，完成在金银合金纳米岛状薄膜表面修饰硫醇基；然后置于1,3-二环己基碳二亚胺、N-羟基丁二酰亚胺和二甲基甲酰胺的混合液F中，室温下反应，使羧酸活化；加入8-arm-PEG-NH₂、N,N-二异丙基乙胺和二甲基甲酰胺的混合液G，使8-arm-PEG-NH₂与金银合金纳米岛状薄膜上活化的羧酸反应，待反应结束，去除表面的溶液，在玻璃基底上形成含修饰8-arm-PEG-NH₂的纳米薄膜；

(5)将经步骤(4)的玻璃基底置于生物素、1,3-二环己基碳二亚胺和N-羟基丁二酰亚胺和二甲基甲酰胺的混合液H中，使8-arm-PEG-NH₂与生物素在室温下反应，待反应结束后，去除表面的溶液，在玻璃基底上形成修饰生物素的纳米薄膜；

(6)将经步骤(5)的玻璃基底置于37℃的磷酸盐缓冲溶液中，浸泡，待浸泡结束后去除表面的溶液；将streptavidin-IRDye800溶液滴到经过浸泡的含修饰生物素纳米薄膜的玻璃基底上，在10～38℃反应，反应结束后用磷酸盐吐温缓冲液清洗，在玻璃基底上形成高荧光增强效果的金银合金纳米岛状薄膜。

2.根据权利要求1所述的高荧光增强效果的金银合金纳米岛状薄膜的制备方法，其特征在于，所述混合液B中，四氯合金酸、氨水和水的用量比为0.1125～0.3375mmol：0.75mL：32.25mL；

所述混合液C中，四氯合金酸、NH₂OH和水的用量比为0.05～0.15mmol：5mL：43mL；

所述混合液D中，硝酸银、氨水、氢氧化钠、D-葡萄糖和水的用量比为17～34g：0.25mL：1mL：1mg：37.75mL；

所述混合液E中，2-巯基乙醇、4-巯基-1-丁醇、6-巯基-1-己醇、11-巯基-1-十一醇、16-巯基十六烷基酸和乙醇的用量比为1～3μL：4～6μL：5～7μL：10～20mg：15～30mg：500mL；

所述混合液F中，1,3-二环己基碳二亚胺、N-羟基丁二酰亚胺和二甲基甲酰胺的用量比为51.6mg：25～35mg：25mL；

所述混合液G中，8-arm-PEG-NH₂、N,N-二异丙基乙胺和二甲基甲酰胺的用量比为50～65mg：173～175μL：10mL；

所述混合液H中，生物素、1,3-二环己基碳二亚胺和N-羟基丁二酰亚胺和二甲基甲酰胺的用量比为50～75mg：51.6mg：28.8mg：25mL；

所述8-arm-PEG-NH₂与生物素的用量比为50～65mg：50～75mg。

3.根据权利要求1所述的高荧光增强效果的金银合金纳米岛状薄膜的制备方法，其特征在于，所述混合液A中，丁二酸酐、二异丙基乙基胺和二甲基甲酰胺的用量比为0.45g：0.606mL：25mL。