[发明专利]高通量筛选分泌抗原特异性抗体浆细胞的装置及方法

权利要求书

1.高通量筛选分泌抗原特异性抗体浆细胞的装置，其特征在于，包括：

微孔阵列，微孔的横截面尺寸不大于500μm，所述微孔阵列用于铺B细胞与荧光探针偶联标记的抗IgG二抗混合液；

盖片，其用于覆盖所述微孔阵列，所述盖片朝向所述微孔阵列的表面包埋有抗原。

2.如权利要求1所述的高通量筛选分泌抗原特异性抗体浆细胞的装置，其特征在于，所述微孔阵列形成于培养皿内部底面，覆盖所述内部底面的一部分区域或全部区域。

3.如权利要求1所述的高通量筛选分泌抗原特异性抗体浆细胞的装置，其特征在于，所述微孔的深度不大于500μm。

4.如权利要求1所述的高通量筛选分泌抗原特异性抗体浆细胞的装置，其特征在于，所述微孔的容积不大于150nL。

5.如权利要求1所述的高通量筛选分泌抗原特异性抗体浆细胞的装置，其特征在于，所述微孔的横截面形状为双耳圆形、双耳正方形、双耳六边形、双耳长方形、双耳菱形、单耳正方形、单耳六边形、单耳长方形、单耳菱形、或具备单、双耳的不规则形状。

6.高通量筛选分泌抗原特异性抗体浆细胞的方法，其特征在于，包括：

将B细胞与荧光探针偶联标记的抗IgG二抗混合液铺至权利要求1所述的高通量筛选分泌抗原特异性抗体浆细胞的装置中的微孔阵列，并用包埋有抗原的盖片覆盖所述微孔阵列；

放入培养箱内孵育；

选择所述微孔阵列中存在荧光信号的微孔，获取微孔内的浆细胞。

7.如权利要求6所述的高通量筛选分泌抗原特异性抗体浆细胞的方法，其特征在于，使用二氧化碳培养箱孵育2～3小时。

8.如权利要求6所述的高通量筛选分泌抗原特异性抗体浆细胞的方法，其特征在于，用倒置荧光显微镜扫描所述微孔阵列，确定存在荧光信号的微孔。

9.如权利要求6所述的高通量筛选分泌抗原特异性抗体浆细胞的方法，其特征在于，与抗IgG二抗偶联的荧光探针包括FITC、Cy3。

10.如权利要求6所述的高通量筛选分泌抗原特异性抗体浆细胞的方法，其特征在于，在盖片上包埋抗原的方法包括：

将抗原涂覆在盖片表面，静置，用牛血清蛋白进行封闭，依次用缓冲液、培养基洗涤。