[发明专利]一种用于含羰基甾体化合物衍生化试剂的合成方法

说明书

本发明涉及一种用于含羰基甾体化合物衍生化试剂的合成方法，属于化学合成技术领域。合成方法为先利用1,3‑二溴丙烷和N‑羟基邻苯二甲酰亚胺反应合成2‑(3‑溴丙氧基)异吲哚啉‑1,3‑二酮；再利用2‑(3‑溴丙氧基)异吲哚啉‑1,3‑二酮制备3‑((1,3‑二氧代‑2‑异吲哚啉基)‑氧基)‑N,N,N‑三甲基丙基溴化铵；最后对3‑((1,3‑二氧代‑2‑异吲哚啉基)‑氧基)‑N,N,N‑三甲基丙基溴化铵进行肼解。本发明的合成方法成本低廉、步骤简单、产率高，能对含羰基甾体化合物进行衍生化，向其中引入永久带电基团‑N⁺Me₃，提高含羰基甾体化合物在ESI‑MS/MS中的检测灵敏度。

技术领域

本发明属于化学合成技术领域，更具体地，涉及一种用于含羰基甾体化合物衍生化试剂的合成方法。

背景技术

含羰基甾体化合物是一类由内分泌系统分泌并调节代谢过程的非极性化合物，具有重要的生理功能。由于含羰基甾体化合物在生物样品中浓度低，离子化效率差，同分异构体多，其分析面临着巨大挑战。目前分析该类化合物常运用衍生化的策略，在分子中引入可电离的基团可显著提高其灵敏度。常用的衍生化试剂包括丹磺酰氯(DNS-Cl)、吡啶甲酸(PA)、1-甲基咪唑-2-磺酰氯(MLDS)、吡啶-3-磺酰氯(PS)、(3-二甲基氨基苯基)二羟基硼烷(DAPB)、2-溴吡啶-5-硼酸(BPBA)、2-肼吡啶和羟胺。另一种方法是使用季铵衍生物，在分子中引入永久带电基团，以减少ESI源中的电离抑制，例如吉拉德P和吉拉德T试剂、氧胺季铵盐(QAO)试剂和N-甲基吡啶-3-磺酰氯(NMPS)试剂。

与吉拉德试剂相比，QAO试剂也可以对羰基进行衍生化，但其检测灵敏度更高。与羟胺相比，QAO试剂衍生化产物稳定性更好，灵敏度更高。因此，QAO试剂广泛用于含羰基甾体化合物的衍生化，然而目前关于其合成方法尚未见报道。

发明内容

本发明解决了现有技术中含羰基甾体化合物的衍生化试剂衍生化产物稳定性不好以及灵敏度不高的技术问题。本发明的内容是提供一种用于含羰基甾体化合物衍生化试剂的合成方法，用于对含羰基甾体化合物进行衍生化。合成方法为先利用1,3-二溴丙烷和N-羟基邻苯二甲酰亚胺反应合成2-(3-溴丙氧基)异吲哚啉-1,3-二酮；再利用2-(3-溴丙氧基)异吲哚啉-1,3-二酮制备3-((1,3-二氧代-2-异吲哚啉基)-氧基)-N,N,N-三甲基丙基溴化铵；最后对3-((1,3-二氧代-2-异吲哚啉基)-氧基)-N,N,N-三甲基丙基溴化铵进行肼解。本发明的合成方法成本低廉、步骤简单、产率高，能对含羰基甾体化合物进行衍生化，向其中引入永久带电基团-N⁺Me₃，提高含羰基甾体化合物在ESI-MS/MS中的检测灵敏度。

按照本发明的第一方面，提供了一种用于含羰基甾体化合物衍生化试剂的合成方法，包括以下步骤：

(1)利用1,3-二溴丙烷和N-羟基邻苯二甲酰亚胺反应合成2-(3-溴丙氧基)异吲哚啉-1,3-二酮；

(2)再利用步骤(1)所述的2-(3-溴丙氧基)异吲哚啉-1,3-二酮制备3-((1,3-二氧代-2-异吲哚啉基)-氧基)-N,N,N-三甲基丙基溴化铵；

(3)在甲醇或四氢呋喃溶液中对步骤(2)所述的3-((1,3-二氧代-2-异吲哚啉基)-氧基)-N,N,N-三甲基丙基溴化铵进行肼解，即得到式(Ⅰ)所示结构的氧胺季铵盐化合物；

优选地，步骤(1)中合成2-(3-溴丙氧基)异吲哚啉-1,3-二酮的方法是：将1,3-二溴丙烷与N-羟基邻苯二甲酰亚胺在N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或乙腈中反应，制备得到2-(3-溴丙氧基)异吲哚啉-1,3-二酮；