[发明专利]R848在制备抑制新型冠状病毒SARS-CoV-2药物中的应用

说明书

本发明属于生物制剂领域，公开了R848在制备抑制新型冠状病毒SARS‑CoV‑2药物中的应用，申请人通过体外细胞试验和小鼠实验，发现R848对Caco‑2细胞的毒性作用小，在体外细胞水平能够显著抑制SARS‑CoV‑2对Caco‑2细胞的感染，抑制其在细胞中的增殖，具备安全高效的特点；同时通过构建小鼠SARS‑CoV‑2感染模型，发现R848可以显著降低小鼠体重下降程度，降低小鼠肺组织中的病毒含量，提高小鼠的存活率，这使得R848具有非常大的临床治疗潜力。

技术领域

本发明属于生物制剂领域，具体涉及R848在制备抑制新型冠状病毒SARS-CoV-2药物中的应用。

背景技术

由严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(severe acute respiratory syndromecoronavirus 2,SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 19,COVID-19)于2019年底出现并呈现全球爆发，严重危害人类健康和公共卫生安全，给世界社会和经济带来巨大负担，已引发全球范围内的高度关注。截止到2020年8月底，全球累计新冠肺炎确诊病例超过2450万例，死亡人数超过83万。许多国内外学者推测新冠病毒或将类似于流感病毒，与人类长期共存。而且现有的研究报道和数据表明SARS-CoV-2的致死率远高于流感，然而到目前为止还没有专门针对新型冠状病毒治疗和预防的药物或商品化疫苗可以使用。因此，研究并开发新型抗SARS-CoV-2的药物具有重要意义。

R848(瑞喹莫德，Resiquimod)是一种免疫反应调节剂，用作有效的TLR7/8激动剂，诱导细胞因子TNF-α、IL-6和IFN-α的上调。R848能够激活免疫细胞，并通过Toll样受体7(TLR7)-MyD88-依赖性信号通路诱导野生型脾细胞的增殖。R848也会调节树突细胞以增加巨细胞病毒和HIV-1特异性T细胞应答。R848诱导髓源性抑制细胞分化为巨噬细胞和树突细胞，并且可以通过减少免疫抑制的MDSCs提高癌症免疫治疗效果。在野生型小鼠中，R848诱导IFN-α，TNF-α和IL-12的血清浓度增加，而TLR7缺失或MyD88缺失的小鼠不会增加其细胞因子。在过敏性哮喘小鼠模型中，R848通过减少Nrf2信号从而减少过敏原诱导的气道反应和炎症。作为免疫佐剂，在体外R848能显著增强IL-12的分泌；在体内，与其他TLR配体佐剂相比，R848更有效地促进DC和NK细胞向小鼠淋巴结中聚集并诱导CD4+和CD8+效应T细胞生成，与其他免疫佐剂相比，R848更具增强Th1细胞免疫作用。

R848可以抑制寨卡病毒、乙肝病毒、艾滋病毒等在细胞上的复制，除此之外，R848还可以作为某些病毒疫苗的佐剂。但目前，尚未发现任何关于R848抗SARS-CoV-2病毒的相关报道。

发明内容

本发明的目的在于弥补现有技术的不足，提供了一种小分子化合物R848(瑞喹莫德，Resiquimod)在制备治疗或预防新型冠状病毒SARS-CoV-2感染药物中的应用，从而为临床上SARS-CoV-2的治疗提供一种有效的小分子化合物。R848分子式为C₁₇H₂₂N₄O₂，分子量为314.38，具有结构式Ⅰ所示的结构：

为了达到上述目的，本发明采用以下技术措施：

R848在制备治疗或预防SARS-CoV-2感染药物中的应用，本发明对R848的药效用下述方法进行评价：

1.在体外细胞水平评价R848细胞毒性及R848抗SARS-CoV-2病毒活性，其步骤如下

1)将已长成单层的96孔板中Caco-2细胞用PBS洗一遍，R848用2％血清的DMEM(维持液)倍比稀释成不同浓度，加入96孔板中，每个稀释度平行做3孔，并设置正常细胞对照。