[发明专利]基于免疫组化空间电化学检测样品中抗原含量的方法

权利要求书

1.一种基于免疫组化电化学检测样品中抗原含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：将电化学信号修饰到抗体上，将电化学信号修饰后的抗体与待测抗原含量的样品混合，进行抗原抗体的结合，使用电化学仪检测与抗原结合的抗体的电化学信号或检测未与抗原结合的抗体电化学信号，将测得的电化学信号跟电化学信号的标准曲线进行比较，计算获得待测样品中抗原的含量；

当待测抗原含量的样品为待测抗原含量的组织时，将待测抗原含量的组织与电化学信号修饰后的抗体混合后，共孵育，进行抗原抗体的结合，去除待测抗原含量的组织，使用差分脉冲伏安法检测未结合的抗体电化学信号，将测得的电化学信号跟电化学信号的标准曲线进行比较，计算获得待测抗原含量的组织中抗原的含量；

当待测抗原含量的样品为待测抗原含量的细胞时，将待测抗原含量的细胞与电化学信号修饰后的抗体混合后，共孵育，进行抗原抗体的结合，离心去除未结合的抗体，使用差分脉冲伏安法检测细胞表面电化学信号，将测得的电化学信号跟电化学信号的标准曲线进行比较，计算获得待测抗原含量的组织中抗原的含量；

使用电化学仪检测电化学信号时，使用的电极为表面修饰有树枝状金和导电高分子的电极。

2.根据权利要求1所述基于免疫组化电化学检测样品中抗原含量的方法，其特征在于，

当使用电化学仪检测与抗原结合的抗体的电化学信号时，测得的电化学信号跟电化学信号的标准曲线进行比较，计算获得与抗原结合的抗体的含量，根据与抗原结合的抗体的含量，计算得出检测样品中抗原含量；

当使用电化学仪检测未与抗原结合的抗体电化学信号时，将测得的电化学信号跟电化学信号的标准曲线进行比较，计算获得未与抗原结合的抗体的含量，根据与待测抗原样品混合之前的电化学信号修饰的抗体的总量计算与抗原结合的抗体的含量，根据与抗原结合的抗体的含量，计算得出检测样品中抗原含量。

3.根据权利要求1所述基于免疫组化电化学检测样品中抗原含量的方法，其特征在于，电化学信号的标准曲线是通过以下方法制作的：使用电化学仪检测三元电池法下不同浓度的电化学信号，以浓度的log值为X轴，所对应的电流值为Y轴，制作线性曲线，即为电化学信号的标准曲线。

4.根据权利要求1所述基于免疫组化电化学检测样品中抗原含量的方法，其特征在于，通过使用不同电化学信号修饰不同抗体，可以实现相应抗原的同时检测。

5.根据权利要求1所述基于免疫组化电化学检测样品中抗原含量的方法，其特征在于，所述电化学信号选自二茂铁或量子点，所述量子点选自ZnS、CdS、CdTe或PbS。

6.一种基于免疫组化空间电化学检测样品中抗原含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

a.将电化学信号修饰到抗体上；

b.将电化学信号修饰后的抗体加入待测组织中，共孵育，进行抗原抗体的结合；

c.去除待测抗原含量的组织，使用差分脉冲伏安法检测未结合的抗体电化学信号；

d.将测得的电化学信号跟电化学信号的标准曲线进行比较，计算获得待测抗原含量的组织中抗原的含量；

e.提取其他部分区域组织，重复上述检测方法，获得不同区域组织的电化学信号值；

f.将不同区域得出的电化学信号值转化为热图，通过与HE(苏木素-伊红)图组合实现空间免疫组化电化学检测；

使用电化学仪检测电化学信号时，使用的电极为表面修饰有树枝状金和导电高分子的电极。

7.根据权利要求6所述基于免疫组化空间电化学检测样品中抗原含量的方法，其特征在于，步骤f中，将不同区域得出的电化学信号值转化为热图是空间检测的常规方法，根据热图中点的颜色的变化，直观表达出不同区域组织中抗原含量的多少，抗原高表达的地方热图中点的颜色越深，抗原低表达的地方热图中点的颜色越浅。