[发明专利]EB病毒疫苗及其应用

说明书

本发明涉及预防或治疗EB病毒感染或其诱发的疾病或癌症的疫苗、用途和方法。一方面，本发明涉及EB病毒疫苗，其包含细菌菌影和EB病毒抗原，用于预防或治疗EB病毒感染或其诱发的疾病或癌症。另一方面，本发明涉及包含细菌菌影和EB病毒抗原的组合物在制备用于预防或治疗EB病毒感染或其诱发的疾病或癌症的疫苗中的用途。另一方面，本发明涉及预防或治疗EB病毒感染或其诱发的疾病或癌症的方法，包括向受试者施用预防有效量或治疗有效量的EB病毒疫苗。另一方面，本发明涉及制备包含细菌菌影和EB病毒抗原的疫苗的方法。

技术领域

本发明涉及预防或治疗EB病毒感染或其引发的疾病、肿瘤或癌症的疫苗、组合物、用途和方法。

背景技术

恶性疾病仍是世界各地的主要健康问题。未来20年内，全世界的肿瘤发病率将增长57％(1)。标准的癌症治疗策略，包括手术，化学疗法，放射疗法和靶向疗法，通常不会导致大多数患者(尤其是处于疾病晚期的患者)对疾病的长期控制。

当前的研究和临床数据表明，免疫系统，尤其是Th1型细胞毒性免疫反应，对于控制癌症的生长至关重要，因此对于当前的标准癌症治疗方法的治疗活性也至关重要(2-3)。一般认为，癌细胞逃避免疫监视的高能力是导致癌症治疗失败和疾病复发或发展的主要因素(4-5)。

肿瘤免疫疗法旨在通过引发针对肿瘤特异性肿瘤相关抗原(tumor associatedantigen，TAA)的功能强大的免疫反应来激活患者的免疫系统，这将使免疫抑制性肿瘤微环境偏向针对肿瘤的免疫活性状态，从而实现免疫介导的癌症控制，完全地或部分地消除残留的癌细胞或持久稳定的疾病(6)。

作为最有前途的免疫治疗方法之一，治疗性癌症疫苗接种旨在重新教育和重新激活树突状细胞(dendritic cell，DC)以启动抗肿瘤免疫应答。DC是最有效的专业抗原呈递细胞(antigen-presenting cell，APC)，具有出色的免疫刺激和免疫调节特性，并在维持主动免疫和免疫耐受之间的微妙平衡中起着至关重要的作用(7)。许多离体产生的基于DC的癌症疫苗已在临床试验中进行了测试(8)。选择合适的TAA和诱导最佳DC成熟都是治疗性癌症疫苗接种的关键步骤(7)。

细菌菌影(bacterial ghost，BG)是无生命的细菌空细胞膜，它是通过细胞包膜中的通道释放细菌细胞质而产生的。这些空细胞膜可通过在革兰氏阴性细菌中受控地产生噬菌体phi X174裂解蛋白E而生成(9-10)，或通过基于革兰氏阳性细菌中化学物质临界浓度的方法而生成(11-12)。

细菌菌影仍具有细菌细胞表面的完整的抗原结构，可以直接用作疫苗(13-15)。细菌菌影也是装载生物大分子(例如抗原，药物和DNA)的良好的递送系统(16-19)。更重要的是，细菌菌影包含众所周知的先天性免疫刺激成分，因此具有作为有效佐剂的巨大潜力。免疫应答的激发不仅取决于抗原的分子特性或宿主的免疫原性，还取决于抗原制剂的组成。因此，大多数疫苗制剂包含免疫调节成分，广泛地称为佐剂，以增强针对弱免疫原性抗原的免疫应答。佐剂可通过刺激宿主免疫系统细胞中的先天免疫受体来增强疫苗抗原的免疫原性(20-21)。细菌菌影保留了细菌菌影膜成分的抗原性，例如脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)，鞭毛蛋白，肽聚糖等，它们是各种模式识别受体(pattern recognition receptor，PRR)的配体，被统称为病原体相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns，PAMP)，因此与天然细菌的成分相同(18-19，22)。这些包膜结构可被免疫细胞和非免疫细胞有效地识别和吸收(23-25)，它们主要通过Toll样受体2(toll-like receptor 2，TLR2)和Toll样受体4(toll-like receptor，TLR4)途径刺激细胞(26-27)，存在于免疫细胞和非免疫细胞上的多个Toll样受体(TLR)构成了这些包膜结构佐剂活性的基础。因此，细菌菌影不仅是极好的抗原递送系统，而且还是治疗性疫苗的有效佐剂。此外，细菌菌影的颗粒性质使其成为吞噬抗原呈递细胞(如树突状细胞和巨噬细胞)的理想体内靶向载体。