[发明专利]口腔鳞状细胞癌诊断模型的构建方法、标志物及其应用

说明书

提供一种口腔鳞状细胞癌辅助诊断标志物，其由LysoPC(16:0)、LysoPC(18:1)、牛磺酸和谷氨酸组成。本发明还提供一种口腔鳞状细胞癌辅助诊断模型构建方法，其包括：步骤一、获取训练病例集；步骤二、采集所述受试者的血清样本，对血清样本进行超高效液相色谱‑四极杆/静电场轨道阱串联高分辨质谱分析，得到多个差异代谢物；步骤三、从多个差异代谢物确定LysoPC(16:0)、LysoPC(18:1)、牛磺酸和谷氨酸作为口腔鳞状细胞癌的辅助诊断模型。本发明提供一种辅助诊断模型，其在诊断口腔鳞状细胞癌上具有微创、准确度高的优点。

技术领域

本发明涉及医疗技术领域，尤其涉及一种口腔鳞状细胞癌诊断模型的构建方法、标志物及其应用。

背景技术

全世界每年约有35万口腔癌新发病例，其中口腔鳞状细胞癌(oral squamouscell carcinoma,OSCC)约占口腔恶性肿瘤的90％。OSCC发病隐匿，容易转移，侵袭性高，多数患者就诊时已处于中晚期阶段，且术后常伴随面容畸形、进食或语言功能丧失，严重影响患者的生活质量。目前，病理组织活检技术是诊断OSCC的主要手段，虽然特异性高，但不利于早期筛查。近年来，生物标志物的出现意味着一种新型的诊断模式。生物标志物是指与疾病诊断或预后过程相关的实验室指标。将生物标志物的检测结果与临床症状相结合，可以尽早做出诊断，改善患者预后。因此，通过分析OSCC患者血清中相关指标的变化发现并鉴定出有诊断价值的生物标志物具有非常重要的临床意义和社会价值。

代谢组学技术是探索组成生物体的各种类型分子相互作用的高通量技术。通过代谢谱探寻机体代谢物的改变，筛选出灵敏度、特异性较高的生物标志物以提高诊断准确性。近年来，组学技术广泛应用于心血管疾病、消化系统疾病、泌尿系统疾病等诊断生物标志物的发现与鉴定，但国内关于OSCC的诊断生物标志物研究相对较少。

因此，如何提供一种微创的、更准确的方法来诊断口腔鳞状细胞癌，是本领域技术人员亟待解决的技术问题。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一种口腔鳞状细胞癌辅助诊断标志物，该所述辅助诊断标志物由LysoPC(16:0)、LysoPC(18:1)、牛磺酸和谷氨酸组成。

本发明另一方面提供一种口腔鳞状细胞癌辅助诊断模型构建方法，其包括：步骤一、获取训练病例集，所述训练病例集中的受试者包括患病受试者和健康受试者；步骤二、采集所述受试者的血清样本，对所述血清样本进行超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱串联高分辨质谱分析，得到所述患病受试者和所述健康受试者的多个差异代谢物；步骤三、利用变量权重重要性排序和受试者工作特征曲线，从多个所述差异代谢物确定LysoPC(16:0)、LysoPC(18:1)、牛磺酸和谷氨酸作为口腔鳞状细胞癌的辅助诊断模型。

在某些实施方式中，所述的口腔鳞状细胞癌辅助诊断模型构建方法中，包括：所述辅助诊断模型的曲线下面积、敏感度和特异性分别为0.998、96.1％和99.9％；所述辅助诊断模型的截断值为0.693。

在某些实施方式中，所述的口腔鳞状细胞癌辅助诊断模型构建方法中，包括：所述辅助诊断模型中所述LysoPC(16:0)的曲线下面积为0.970，所述LysoPC(18:1)的曲线下面积为0.950，所述牛磺酸的曲线下面积为0.905，所述谷氨酸的曲线下面积为0.912。

在某些实施方式中，所述的口腔鳞状细胞癌辅助诊断模型构建方法中，包括：还包括血清处理步骤，具体为：收集所述受试者空腹状态下的血液样本；静置半小时后在4℃、3000rpm转速的条件下离心10min，得到血清样本，将所述血清样本放置在超低温冰箱中保存备用；所述血清样本在冰上解冻，吸取100μL所述血清样本置于1.5mL离心管中，然后加入0.3mL含内标的甲醇溶液，所述内标为：0.05μg/mL L-2-氯代苯丙氨酸和0.5μg/mL酮洛芬；涡旋处理1min后，在4℃条件下，13000rpm离心10min；吸取上清液至进样小瓶中，待质谱进行分析。