[发明专利]一种去除血清中抗生素的方法及其应用

说明书

本发明公开了一种去除血清中抗生素的方法及其应用。所述的去除血清中抗生素的方法，包括如下步骤：S1、对血清样品进行四环素检测；S2、将活性炭加入到四环素检测为阳性的血清原液中；S3、将S2中获得的活性炭与血清的混合物，搅拌混匀；S4、吸附完成后，无菌过滤除去血清中的活性炭；S5、对处理后的血清样品进行四环素含量检测，检测结果为四环素阴性的血清为合格。本发明通过活性炭吸附处理，不仅能有效去除血清中的四环素，并且同时能有效去除血清中的激素、内毒素等有机小分子物质，不仅能满足相关科学研究的需求，更加提高了牛血清的品质。

技术领域

本发明涉及抗生素技术领域，具体而言，涉及一种去除血清中抗生素的方法及其应用。

背景技术

牛血清(主要为胎牛血清及新生小牛血清)作为细胞培养液的重要组成成分，自细胞培养技术应用以来，便几乎成为一种必不可少的添加成分，广泛应用于疫苗等生物制药行业及科学研究中。然而，四环素类抗生素因具有高效和广谱抗菌的特性，被广泛应用于农业、养殖行业，势必造成牛体内四环素类抗生素的累积，对牛血清造成污染。牛血清中存在的四环素等抗生素的残留一方面会影响生物制品的质量；另一方面，在四环素调控的基因表达系统研究中，若使用被四环素污染的牛血清将直接对试验造成干扰，甚至导致试验的失败。在动物细胞培养过程中，配制细胞培养基时通常需要加入一定体积的胎牛或小牛血清。若使用了含四环素的胎牛或小牛血清，将直接导致四环素调控系统的失灵，以至于实验的失败，因此，确保细胞培养过程中使用不含四环素的牛血清对四环素调控系统相关实验的成败至关重要。

牛血清作为一种无菌生物制剂，该溶液中四环素等抗生素的去除办法与普通水处理存在较大差异，在牛血清的处理过程中，不仅需要确保全程无菌，还需保证没有其他的风险因子引入，否则将直接影响牛血清的质量。因此对处理的原材料及工艺条件都有一定的要求，不可将水处理的方法直接用于牛血清的处理。

目前关于水溶液中四环素的去除方法主要包括物理吸附法、化学分解法及生物降解法等。但尚未见有关牛血清中四环素的去除方法的文献报道。在目前四环素去除的几种方法中，化学分解和生物降解法因会直接对牛血清品质造成影响，并且会引入新的风险因子，因此不适合用于无菌试剂牛血清的处理。同时牛血清中含有较高的蛋白质和较多的生物活性物质，因此在选用处理的材料时应特别注意不能影响牛血清本身的质量。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明采用药用活性炭，吸附去除血清中残留的四环素等抗生素，之后采用无菌过滤工艺去除牛血清中的活性炭，最后通过超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱检测，显示该处理方法能安全、有效、简单地去除血清中的四环素。

具体地，本发明提供了一种去除血清中抗生素的方法，S1、对血清样品进行四环素检测；S2、将活性炭加入到四环素检测为阳性的血清原液中；S3、将S2中获得的活性炭与血清的混合物，搅拌混匀；S4、吸附完成后，无菌过滤除去血清中的活性炭；S5、对处理后的血清样品进行四环素含量检测，检测结果为四环素阴性的血清为合格。

优选地，所述的血清样品为牛血清、人血清、羊血清、马血清中的一种。

优选地，所述步骤S1中血清样品中四环素的检测采用超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱法。

优选地，所述步骤S1中检测的血清样本的四环素为阳性。

优选地，所述步骤S2中所述活性炭与血清原液的比例为1:1000-1:100。

优选地，所述的活性炭为医用活性炭。

优选地，所述的活性炭购自合格的活性炭厂家，厂家提供活性炭的质检报告，质检报告显示其质量均符合《中国药典(2015版四部)》的相关要求。

优选地，所述的活性炭的用量为1-10g/L。

优选地，所述步骤S3中搅拌时间为1～48小时。