[发明专利]一种从沙棘果油中分离纯化植物甾醇的方法

说明书

本发明涉及植物甾醇的提取制备技术领域，具体涉及一种从沙棘果油中分离纯化植物甾醇的方法。具体通过皂化、萃取、水洗、浓缩、甾醇粗制品制取及干燥抽滤制得精制沙棘甾醇六个步骤实现。本发明从沙棘果油中分离纯化植物甾醇的方法，工艺步骤简单、易操作；设备规格及参数指标要求低，所需试剂价格低廉且回收率较高、能耗低；提取沙棘果油中的甾醇纯度和回收率较高，得率可达到0.266％，适用于实验室或产量中小规模的生产加工企业使用；所提取的植物甾醇结构未破坏。

技术领域

本发明涉及植物甾醇的提取制备技术领域，具体涉及一种从沙棘果油中分离纯化植物甾醇的方法。

背景技术

沙棘(Hippophae rhamnoides Linn.)为胡颓子科酸刺属的灌木或小乔木，别名醋柳、黑刺、酸刺等。具有抗寒抗旱，耐盐碱、耐瘠薄，生态适应性广的特点，作为防风固沙、保持水土的“生态保护先锋树种”在我国大面积种植。沙棘是药食两用植物，《中药大辞典》中记载沙棘果的药性是“性温，味酸涩，入肺、胃、大肠、小肠经”。沙棘在中国古代就是藏医、蒙医的常用药材，公元8世纪的藏医名著《四部医典》记载：沙棘具有健脾养胃、破淤止血、祛痰、利肺、化湿、壮阴、升阳的作用，唐代藏医药著《月王药珍》、清代药学经典《晶珠本草》和19世纪著名蒙药名著《无误蒙药鉴》中均记载了沙棘具有利肺止咳、活血化淤、利心脏血脉、消痰浊、增强体阳、开胃舒胸、饮食爽口、容易消化等功效。国内外学者研究表明沙棘含有丰富的甾醇类、黄酮类、原花青素、三萜烯类、鞣质等200余种生物活性物质。而植物甾醇是植物生长过程中的重要次生代谢产物，结构中含有不饱和双键、羟基、碳环等官能团，被誉为“生命的钥匙”和“血管的清道夫”。具有抗氧化、降低血脂、免疫调节、消炎退热等功能，在医药、保健和食品领域具有广阔的发展空间。

植物甾醇的主要来源是植物油脂，目前对沙棘果油中甾醇的提取纯化方法较少，主要有以下几种：(1)分子蒸馏法：依靠不同物质分子逸出后的运动平均自由程的差别来实现物质分离的技术，此技术可以起到浓缩植物甾醇的作用，但流程长，步骤多，产品的纯度和回收率不高。(2)吸附法：根据吸附剂对不同组分吸附的选择性差异进行分离，提取的植物甾醇纯度较高，但是洗脱时间过长，溶剂消耗量大。(3)酶法：酶法是使用酶对酯化过程进行催化，从而提高植物甾醇的纯度及回收率方法，但酶的价格高使用寿命短。(4)超临界CO₂萃取法：通过选择操作条件，在溶解度较高的脂肪酸、甘油三酯被萃取后，将留在萃取器中的植物甾醇再进行分离纯化，或者直接用制得的植物甾醇制品进入此分离系统进行分离，但设备复杂且费用高。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明采用皂化法，在不破坏提取物结构，保持稳定的生物活性，提高提取率的原则下，提供一种从沙棘果油中分离纯化植物甾醇的方法。

本发明的一种从沙棘果油中分离纯化植物甾醇的方法技术方案：具体包括如下步骤：

步骤一，皂化：将新鲜沙棘果制备的沙棘果油称重，与1～4mol/L的乙醇-氢氧化钾混合溶液按1：5～8g/mL的料液质量体积比，温度为65～95℃条件下恒温水浴冷凝回流皂化120～200min；

步骤二，萃取：首先，将冷凝回流结束后的乙醇-氢氧化钾混合液进行萃取，萃取2～3次；其次，将上述混合液冷却后，按1:1～4的体积比加入蒸馏水；最后，在上述加蒸馏水的混合液中，按1:1～5的体积比加入正己烷萃取2～3次，合并正己烷萃取液；

步骤三，水洗：将合并后的正己烷萃取液经1:1～3体积比的蒸馏水水洗至中性，以加入1％酚酞指示剂不变色为准，按1:1～2体积比加入0.4～0.8mol/L的乙醇-氢氧化钾溶液洗脱1～3次，再经1:1～3体积比的蒸馏水水洗至中性，以加入1％酚酞指示剂不变色为准；

步骤四，浓缩：水洗后的萃取液经真空减压浓缩回收溶剂正己烷，得到沙棘果油不皂化物；