[发明专利]Siglec-15单克隆抗体及其应用

说明书

本发明涉及Siglec‑15单克隆抗体及其应用。本发明通过细胞融合和杂交瘤技术，获得的人Siglec‑15单克隆抗体能高特异性结合表达人Siglec‑15抗原的细胞，本发明的靶向人Siglec‑15的单克隆抗体制备方法步骤简单，获得的抗人Siglec‑15的单克隆抗体可以很好地检测肿瘤细胞上表达的Siglec‑15蛋白。本发明的靶向人Siglec‑15的单克隆抗体，抗体特异性高，在治疗和/或预防或诊断与Siglec‑15有关的疾病例如肿瘤的应用具有很好前景。

技术领域

本发明属于免疫治疗生物医药技术领域，涉及一种靶向人Siglec-15的单克隆抗体，及其制备方法和应用，特别是在治疗和/或预防或诊断与Siglec-15有关的疾病例如肿瘤的应用。

背景技术

众所周知，癌症被认为是死亡的主要原因之一。癌症，也称恶性肿瘤，指机体在各种致癌因素作用下，局部组织的细胞在基因水平上失去对其生长的正常调控导致异常增生与分化而形成的新生物。免疫治疗已成为继手术、放疗、化疗等常规治疗之后的第四大癌症治疗方式。免疫治疗因其副作用小、抗肿瘤活性高、适应症广，而被认为是最有前途的治疗方式。免疫系统具有巨大潜力，不仅能特异性破坏肿瘤并且对正常组织没有毒性。同时，免疫系统检测及破坏异常细胞的天然能力可防止癌症的发展。此外，免疫系统的长期记忆可防止癌症复发。

然而，肿瘤细胞有时能够通过降低其表面的肿瘤抗原表达而避免被免疫系统检测及破坏，使得免疫系统对其的检测更为困难。肿瘤细胞会在其表面表达诱导免疫细胞失活的蛋白质，或诱导周围环境中的细胞释放抑制免疫反应并促进肿瘤细胞增殖和存活的物质。因此，具有吸引力的肿瘤免疫治疗靶点的开发与应用对于癌症的治疗至关重要(参见Mario Sznol和Chen Lieping，Clinical Cancer Research(2013))。

Siglec-15最初被鉴定为Siglec基因家族成员之一，具有特征性唾液酸结合免疫球蛋白型凝集素结构。Siglec-15表达在具有高度免疫抑制性的M2巨噬细胞，可抑制T细胞复制，降低T细胞功能。TCGA数据库分析显示Siglec-15广泛的表达在多种肿瘤包括结肠癌，子宫内膜样癌，甲状腺癌，膀胱癌，肾癌，肺癌和肝癌。研究显示，Siglec-15是一个具有吸引力的肿瘤免疫治疗靶点：第一，Siglec-15在正常组织中的表达有限，Siglec-15敲除后对小鼠的正常生理影响极小，表明Siglec-15不是正常器官和组织生存和生长的必要分子，这是Siglec-15阻断疗法安全性的基础。第二，Siglec-15在肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)和肿瘤细胞中上调，但在正常组织中不上调，表明Siglec-15的作用局限于肿瘤微环境(TME)，这为选择性靶向抗体治疗提供了条件。第三，使用Siglec-15缺陷小鼠进行的肿瘤模型研究表明，Siglec-15对肿瘤部位的T细胞反应具有强大的免疫抑制作用，这种作用由TAM相关的Siglec-15介导。在肿瘤中，Siglec-15和PD-L1的表达互不重叠，说明以Siglec-15为靶点，适用于治疗对PD-1/PD-L1疗法无应答的患者。最后，Siglec-15特异性单克隆抗体能够逆转T细胞抑制，促进肿瘤免疫，并在多种肿瘤模型中抑制肿瘤生长(参见Chen Lieping等人，Nature Medicine(2019))。

综上所述，Siglec-15在正常组织中的独特表达谱，以及在多种肿瘤中的异常表达情况使其成为了非常有吸引力的抗癌治疗靶标。开发靶向人Siglec-15的治疗性抗体作为一款全新的免疫药物，治疗应用潜力巨大，意义非凡。因此，开发靶向人Siglec-15的治疗性抗体具有更大的抗癌潜力、更低的毒性，有更大的最佳用药剂量空间。

发明内容

本发明的目的是提供一种人Siglec-15单克隆抗体及其应用。

本发明的另一目的在于提供上述人Siglec-15单克隆抗体的编码基因。

本发明的又一目的在于提供上述人Siglec-15单克隆抗体的制备方法。

本发明的又一目的在于提供一种抗肿瘤制剂。