[发明专利]哈茨木霉酸A化合物以及产该化合物的哈茨木霉突变株

说明书

本发明涉及一种哈茨木霉酸A化合物，其分子结构如式(Ⅰ)所示，该化合物具有低细胞毒性和高抗炎活性。本发明还涉及一种产哈茨木霉酸A化合物的哈茨木霉突变菌株，其为敲除了组蛋白去乙酰化酶基因HOS2的哈茨木霉菌，该菌株用于生产哈茨木霉酸A化合物操作简单，产率高，且重复性好。

技术领域

本发明属于真菌天然产物领域，涉及一种哈茨木霉酸A化合物以及产该化合物的哈茨木霉突变株。

背景技术

真菌的次级代谢产物是新药和先导化合物的重要来源，然而随着越来越多的化合物被重复发现，真菌来源的天然产物发掘逐渐到了瓶颈期。随着基因组测序技术的成熟和生物信息学分析方法的完善，研究人员发现真菌的生物合成基因簇(Biosynthetic geneclusters，BGCs)十分丰富，然而由于实验室培养条件的限制，超过70％的生物合成基因簇处于沉默或未开发状态，表明真菌天然产物的发掘还有很大的空间。因此，如何激活这些沉默基因簇成为真菌天然产物研究的关键。

真菌天然产物发现的研究策略主要有四种：(1)采用极端环境微生物(从来自特殊环境例如温泉、火山、盐碱地等密切相关的真菌中发现新化合物)、优化培养条件。其操作简单，但是工作量大效率低，大量实验中仅获得极少量的新化合物；(2)异源表达。该方法能获得新活性化合物同时能够阐明沉默基因簇的功能，但是需要进行基因簇的组装，由于基因簇往往较大，实验难度系数大；(3)转录调控。真菌的次级代谢涉及复杂的调控网络，对调控基因的编辑有助于新化合物的发现。其中，表观遗传学方法，对组蛋白进行修饰，能够在全局发挥调控作用。常用化学表观修饰，适用小分子表观遗传修饰因子抑制剂。其操作相对简单，但是无法获得具有遗传性的转化子，实验重复性差。因此寻找实验操作简单，重复性好的天然产物挖掘策略具有重要意义。

发明内容

本发明的目的之一是针对现有技术存在的缺陷，提供一种哈茨木霉酸A化合物，该化合物具有低细胞毒性和高抗炎活性。

本发明的目的之二在于提供一种产哈茨木霉酸A化合物的哈茨木霉突变菌株，该菌株用于生产哈茨木霉酸A化合物操作简单，产率高。

为此，本发明第一方面提供了一种哈茨木霉酸A化合物(trichoharzianin A)，其分子结构如式(Ⅰ)所示：

根据本发明，所述哈茨木霉酸A化合物具有低细胞毒性；具体地，所述哈茨木霉酸A化合物的抗肿瘤活性为：浓度为10μM的哈茨木霉酸A化合物对肿瘤细胞A549、HCT-8、HepG2和MCF-7的抑制率分别为4.84％、11.82％、5.30％和2.47％。

根据本发明，所述哈茨木霉酸A化合物具有高抗炎活性；具体地，所述哈茨木霉酸A化合物的抗炎活性为：浓度为10μM的哈茨木霉酸A化合物对脂多糖诱导小胶质细胞BV2产生的NO及炎症因子IL-1、IL-6和TNF-α的抑制率分别为41.11％、75.00％、16.67％和28.57％。

在本发明的一些实施例中，所述哈茨木霉酸A化合物的分子式为C₁₃H₁₈O₃，分子量为223.13。

本发明第二方面提供了一种产哈茨木霉酸A化合物哈茨木霉突变株，其为敲除了组蛋白去乙酰化酶基因HOS2(M431DRAFT_478849)的哈茨木霉菌。

本发明中，所述组蛋白去乙酰化酶基因HOS2的哈茨木霉菌的序列如SEQ No.3所示。

在本发明的一些实施例中，所述哈茨木霉菌的保藏编号为CGMCC 3.9236。

本发明第二方面提供了一种如本发明第二方面所述的哈茨木霉突变株在生产分子结构如式(Ⅰ)所示的哈茨木霉酸A化合物中的应用。