[发明专利]测定褪黑素和维生素B6

权利要求书

1.一种测定褪黑素和维生素B₆含量高效液相色谱分析方法，其特征在于，供试品的提取溶剂为含水溶液，提取方法为超声提取；流动相A为甲醇，流动相B为磷酸盐缓冲溶液，梯度洗脱，紫外检测波长设定为210～279nm。

2.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，流动相梯度洗脱程序为：0-2min，甲醇的体积含量保持为10％，磷酸盐缓冲液的体积含量保持为90％；2-2.01min，甲醇的体积含量由10％变为50％，磷酸盐缓冲液的体积含量由90％变为50％；2.01-8min，甲醇的体积含量保持为50％，磷酸盐缓冲液的体积含量保持为50％；8-8.01min，甲醇的体积含量由50％变为10％，磷酸盐缓冲液的体积含量由50％变为90％；8.01-13min，甲醇的体积含量为10％，磷酸盐缓冲液的体积含量为90％。

3.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述用于供试品的提取溶剂选自甲醇溶液、水或盐酸溶液中的一种，优选盐酸溶液。

4.根据权利要求3所述的分析方法，其特征在于，所述提取溶剂的浓度选自0.001mol/L-0.1mol/L，优选0.005mol/L-0.05mol/L，更加优选0.01mol/L。

5.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述提取方法是水浴超声，温度选自25～60℃，优选30～50℃，更加优选35～45℃。

6.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，作为流动B的磷酸盐缓释液选自0.05～0.1M磷酸二氢钾和0.005～0.01M磷酸氢二钾的混合溶液，优选0.1M磷酸二氢钾和0.01M磷酸氢二钾的混合溶液。

7.根据权利要求6所述的分析方法，其特征在于，所述混合溶液的pH值选自3.00～5.00，优选3.50～4.50，更优选4.00。