[发明专利]一种用于石油烃降解的菌-酶复合制剂的制备及其应用

权利要求书

1.一种用于石油烃降解的菌-酶复合制剂，其特征在于：复合制剂为具有石油烃降解能力的菌剂和该菌剂破碎后获得酶剂；所述菌剂为贪噬菌属JWLC1(Variovorax sp.JWLC1)经30±1℃发酵培养至OD值为1.5～2.5的培养液；所述酶剂为贪噬菌属JWLC1经发酵得到的发酵培养液破碎后经固定化处理后的固液混合物；其中，菌剂和酶剂中发酵培养液的体积比例为1:1～1:3，所述贪噬菌属JWLC1(Variovorax sp.JWLC1)，已于2019年10月11日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏登录号为CCTCC NO：M 2019812。

2.如权利要求1所述的用于石油烃降解的菌-酶复合制剂，其特征在于：所述酶剂为贪噬菌属JWLC1经发酵培养后，培养液直接在300～350W条件下超声破碎处理，破碎处理后混合物经8000～10000rpm离心进行固液分离，收集液体部分为全酶液，固体部分经炭化处理后全部与全酶液混合，混合的比例为200～300ml:1g，4℃条件下静置8～12h，重悬后制得的固液混合物。

3.如权利要求2所述的用于石油烃降解的菌-酶复合制剂，其特征在于：所述固体部分为破碎后分离的贪噬菌属JWLC1细胞残体经脱水风干后，在250～300℃无氧条件下炭化处理1～2h，收集处理后得到的全部固体。

4.一种权利要求1所述的石油烃降解的菌-酶复合制剂在石油烃污染土壤中降解石油烃的应用。

5.如权利要求4所述的石油烃降解的菌-酶复合制剂的应用，其特征在于：可将菌-酶复合制剂一次性或分次施加入石油烃污染土壤中进行石油烃降解处理；所述复合制剂在污染土壤中的施加量为5～10％，且保障土壤中复合制剂中贪噬菌在丰度不小于5×10⁷CFU·g^-1干土。

6.如权利要求5所述的石油烃降解的菌-酶复合制剂的应用，其特征在于：所述分次施加为先向污染土壤中按5～10％的投加比例施加复合制剂中的菌剂，待土壤中石油烃的降解速率降低到初始降解速率的20～50％时，向污染土壤中施加酶剂。