[发明专利]重组抗CD171八价抗体及神经来源外泌体的捕获方法有效
申请号: | 202011088282.7 | 申请日: | 2020-10-13 |
公开(公告)号: | CN112239505B | 公开(公告)日: | 2022-05-20 |
发明(设计)人: | 孙玉龙;郑昌欣;杨亚云;王弢 | 申请(专利权)人: | 上海良润生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C07K16/28 | 分类号: | C07K16/28;C12N15/13;C12N15/85;C12N5/10;C12N5/079 |
代理公司: | 华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 戴志攀 |
地址: | 200135 上海市浦东新区*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 重组 cd171 抗体 神经 来源 外泌体 捕获 方法 | ||
1.一种重组抗CD171八价抗体,其特征在于,包括两条相同的多肽链;所述多肽链从N端到C端依次包括两个第一抗体的可变区、第一接头肽和两个第二抗体的可变区;所述可变区包括轻链可变区和重链可变区,所述轻链可变区和所述重链可变区之间通过第二接头肽连接;所述第一抗体的重链可变区序列如SEQ ID NO:1所示,所述第一抗体的轻链可变区序列如SEQ ID NO:2所示;所述第二抗体的重链可变区序列如SEQ ID NO:3所示,所述第二抗体的轻链可变区序列如SEQ ID NO:4所示,所述第一接头肽包括铰链区序列和连接于所述铰链区序列一端或两端的柔性接头序列;两条所述多肽链之间于铰链区通过共价键结合;所述多肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示。
2.权利要求1所述的重组抗CD171八价抗体在制备用于捕获表达CD171的神经来源外泌体的产品中的应用。
3.一种非疾病诊断和治疗目的的神经来源外泌体的捕获方法,其特征在于,利用权利要求1所述的重组抗CD171八价抗体与神经来源外泌体的特异性结合反应富集所述神经来源外泌体。
4.根据权利要求3所述的捕获方法,其特征在于,包括以下步骤:将权利要求1所述的重组抗CD171八价抗体与固相载体偶联,然后与含有神经来源外泌体的样品混合孵育,使所述重组抗CD171八价抗体与所述神经来源外泌体特异性结合,然后分离所述固相载体。
5.根据权利要求4所述的捕获方法,其特征在于,所述固相载体选自磁珠或树脂,所述含有神经来源外泌体的样品选自血清、血浆、血液、尿液、唾液或脑脊液。
6.一种外泌体捕获试剂盒,其特征在于,包括权利要求1所述的重组抗CD171八价抗体、缓冲液和固相载体。
7.一种表达载体,其特征在于,含有编码权利要求1中所述多肽链的基因序列。
8.根据权利要求7所述的表达载体,其特征在于,编码所述多肽链的基因序列如SEQ IDNO:9所示。
9.一种宿主细胞,其特征在于,含有权利要求7或8所述的表达载体。
10.根据权利要求9所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为COS细胞、CHO细胞、NS0细胞、sf9细胞、sf21细胞、DH5α细胞或BL21细胞。
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