[发明专利]一种多塞平及其代谢产物N-去甲多塞平固相萃取、检测方法及试剂盒有效
申请号: | 202011088378.3 | 申请日: | 2020-10-13 |
公开(公告)号: | CN112362765B | 公开(公告)日: | 2022-06-17 |
发明(设计)人: | 郑天东;侯利平;唐智;谢湘;周玲;欧阳忠华;李芳芳;谢秀芬;李超鹏;陈露露;欧阳冬生 | 申请(专利权)人: | 长沙都正生物科技股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/72;G01N30/06;G01N30/08;G01N30/04;G01N30/34;G01N30/88 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 肖云 |
地址: | 410000 湖南省长沙市长沙高新*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 多塞平 及其 代谢 产物 去甲多塞平固相 萃取 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种多塞平及其代谢产物N-去甲多塞平固相萃取方法,其特征在于,包括以下步骤:
取待测样本,经过酸性稀释剂稀释后,转移至活化后的固相萃取柱上,再依次经过碱性淋洗液、甲醇水淋洗液I和甲醇水淋洗液II淋洗、压干后,加入洗脱液洗脱,收集洗脱后的液相部分;其中,所述甲醇水淋洗液I中甲醇的体积百分数低于20%;所述甲醇水淋洗液II中甲醇的体积百分数高于50%;所述洗脱液为异丙醇-乙腈混合液;所述固相萃取柱中的填料为聚苯乙烯/二乙烯苯。
2.根据权利要求1所述的多塞平及其代谢产物N-去甲多塞平固相萃取方法,其特征在于:所述碱性淋洗液的pH为8.5~11.0。
3.根据权利要求2所述的多塞平及其代谢产物N-去甲多塞平固相萃取方法,其特征在于:所述碱性淋洗液为碳酸氢铵溶液或氨水溶液。
4.根据权利要求3所述的多塞平及其代谢产物N-去甲多塞平固相萃取方法,其特征在于:所述碳酸氢铵溶液的质量百分数为1%~5%。
5.根据权利要求3所述的多塞平及其代谢产物N-去甲多塞平固相萃取方法,其特征在于:所述碱性淋洗液为质量百分数为5%的碳酸氢铵溶液,pH为10.4。
6.根据权利要求1所述的多塞平及其代谢产物N-去甲多塞平固相萃取方法,其特征在于:所述甲醇水淋洗液I中甲醇的体积百分数为1%~10%。
7.根据权利要求1所述的多塞平及其代谢产物N-去甲多塞平固相萃取方法,其特征在于:所述甲醇水淋洗液I中甲醇的体积百分数为5%。
8.根据权利要求1所述的多塞平及其代谢产物N-去甲多塞平固相萃取方法,其特征在于:所述甲醇水淋洗液II中甲醇的体积百分数为60%~90%。
9.根据权利要求8所述的多塞平及其代谢产物N-去甲多塞平固相萃取方法,其特征在于:所述甲醇水淋洗液II中甲醇的体积百分数为80%。
10.根据权利要求1所述的多塞平及其代谢产物N-去甲多塞平固相萃取方法,其特征在于:所述异丙醇-乙腈混合液中异丙醇的体积百分数为30%~60%。
11.根据权利要求10所述的多塞平及其代谢产物N-去甲多塞平固相萃取方法,其特征在于:所述异丙醇-乙腈混合液中异丙醇的体积百分数为50%且含2%甲酸。
12.根据权利要求1所述的多塞平及其代谢产物N-去甲多塞平固相萃取方法,其特征在于:所述固相萃取柱中的填料为Cleanert PEP。
13.根据权利要求1所述的多塞平及其代谢产物N-去甲多塞平固相萃取方法,其特征在于:所述酸性稀释剂为磷酸水溶液。
14.根据权利要求13所述的多塞平及其代谢产物N-去甲多塞平固相萃取方法,其特征在于:所述磷酸水溶液中磷酸的质量百分数为1%~10%。
15.根据权利要求1所述的多塞平及其代谢产物N-去甲多塞平固相萃取方法,其特征在于:所述待测样本选自血浆、脑脊液或关节腔内液。
16.一种多塞平及其代谢产物N-去甲多塞平检测方法,其特征在于:包括以下步骤:
S1、采用如权利要求1至15任一项所述的固相萃取方法对样本中的多塞平及其代谢物N-去甲多塞平进行萃取;
S2、通过LC-MS/MS进行含量分析。
17.一种多塞平及其代谢产物N-去甲多塞平检测试剂盒,其特征在于:包括以下试剂:
多塞平标准品和质控品;
N-去甲多塞平标准品和质控品;
多塞平-d3内标品;
N-去甲多塞平-d3内标品;
固相萃取柱;
淋洗液:碱性淋洗液、甲醇水淋洗液I和甲醇水淋洗液II;
洗脱液;
其中,所述甲醇水淋洗液I中甲醇的体积百分数低于20%;所述甲醇水淋洗液II中甲醇的体积百分数高于50%;所述洗脱液为异丙醇-乙腈混合液;所述固相萃取柱中的填料为聚苯乙烯/二乙烯苯。
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