[发明专利]一种新型海洋贝类小分子免疫活性肽的制备方法和应用

权利要求书

1.一种新型海洋贝类小分子免疫活性肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、取海洋贝类去壳去脏后进行清洗、打浆、匀浆，制得肉糜；

S2、在经步骤S1制得的所述肉糜中加3-6倍体积水，pH为6.4-7.4，煮沸15-30min，冷却至室温后先加入粗酶液，再加入蛋白酶进行酶解，酶解过程中同时进行超声处理，酶解结束后进行灭酶处理，在8000-13000r/min的转速下离心10-15min，上清液通过孔径为30-55nm的滤膜进行超滤分离，收集经滤膜截留的大分子多肽液，并于进风温度为180-220℃，进料速度为30-45ml/min的条件下进行喷雾干燥后，制得新型海洋贝类小分子免疫活性肽；

其中，所述粗酶液的制备过程为：取假单胞菌(Pseudomonas sp.)nic22依次经种子培养基、罐发酵培养基发酵培养后，离心，取上清液，得粗酶液；

所述种子培养基组份如下：1％蛋白胨、1％氯化钠、0.5％酵母提取物、余量水，pH 7.6-8.0；培养条件：32-35℃，150rpm，摇床培养18小时；

所述罐发酵培养基组份如下：1.6％玉米粉、0.1％MnSO₄、0.08％KH₂PO₄、1％KCl、余量水，pH7.6-8.0；接种量：7wt％液体种子，培养条件：溶氧DO维持在40％以上，32-35℃，培养18小时。

2.根据权利要求1所述的新型海洋贝类小分子免疫活性肽的制备方法，其特征在于，S1中，所述海洋贝类为珍珠贝、扇贝、四角蛤和牡蛎中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的新型海洋贝类小分子免疫活性肽的制备方法，其特征在于，S1中，所述匀浆处理的搅拌速率为2000-10000rpm，时间为10-15min。

4.根据权利要求1所述的新型海洋贝类小分子免疫活性肽的制备方法，其特征在于，S2中，所述蛋白酶为诺维信碱性蛋白酶和诺维信风味蛋白酶的混合物，且所述诺维信碱性蛋白酶和诺维信风味蛋白酶的体积比为1-3:3-15。

5.根据权利要求1所述的新型海洋贝类小分子免疫活性肽的制备方法，其特征在于，S2中，所述酶解的时间为1-2h。

6.根据权利要求1所述的新型海洋贝类小分子免疫活性肽的制备方法，其特征在于，S2中，所述超声处理的功率为180-200W，所述超声处理的温度为25-40℃，所述声处理的时间为10-15min。

7.根据权利要求1所述的新型海洋贝类小分子免疫活性肽的制备方法，其特征在于，S2中，所述灭酶处理的具体过程为：加热至90-120℃并保持搅拌2-12min。

8.根据权利要求1所述的新型海洋贝类小分子免疫活性肽的制备方法，其特征在于，S2中，膜过滤的压强为1.0-1.5MPa，分离温度为40-50℃。

9.由权利要求1-8中任一项所述的制备方法制得的新型海洋贝类小分子免疫活性肽。

10.权利要求9所述的新型海洋贝类小分子免疫活性肽在护肤品中的应用。