[发明专利]一种呼吸道感染病原体核酸联合检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种呼吸道感染病原体核酸联合检测试剂盒。本发明开发了一组利用多重荧光定量PCR技术与导流杂交基因芯片技术相结合检测新型冠状病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、人副流感病毒、腺病毒、肺炎支原体和肺炎衣原体多种呼吸道感染病原体的引物与探针组合，其核苷酸序列依次如SEQ ID NO：1～36所示。并构建了呼吸道感染病原体核酸联合检测试剂盒，该试剂盒能够实现对8种呼吸道感染病原体的同步联合检测，检测准确性好、特异性强、灵敏性高，重复性好、假阴性及假阳性低，且检测所需时间短、成本低，能够对患者进行全面的检测，准确定位致病源，及时治疗或进行相应的隔离措施，对于有效控制呼吸道感染以防止相关传染感染爆发具有重要意义。

技术领域

本发明属于生物医学及临床诊断技术领域。更具体地，涉及一种呼吸道感染病原体核酸联合检测试剂盒。

背景技术

呼吸道感染(Respiratory tract infection，RTI)是人类最常见的一类疾病，可以在任何性别、年龄和地域中发生，是全球范围内引起人群发病和死亡的最主要原因之一。呼吸道感染引起的临床症状和体征都较为相似，其临床表现主要为鼻炎、咽炎、喉炎、扁桃体炎等症状，严重的可引起气管炎、支气管炎及肺炎等，但不同病原体引起的感染，其治疗方法、疗效和病程也不尽相同。目前已证明，大部分呼吸道疾病是由细菌外的病原体引起，其中以呼吸道病毒最常见。

常见的呼吸道病毒有流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒等，除病毒外，肺炎支原体和肺炎衣原体也可引起呼吸道感染。流感病毒和副流感病毒主要引起上呼吸道感染，每年冬春季，小孩、老人及长期患有心血管肺炎的病人易于被甲乙流感染。季节性流感通常是由亚型H1、H2、H3、N1和N2引起的。除季节性流感外，2009年初在美国还在人类中发现了新型的H1N1病毒株。副流感病毒(PIV)包含四种亚型，1型和2型的最典型的临床特征是造成儿童喉气管支气管炎，3型经常导致肺炎和细支气管炎，其致病性仅次于呼吸道合胞病毒(RSV)。RSV可引起上下呼吸道疾病，从新生儿到成人任何年龄段都有被感染的可能。我国每年数千万住院的婴幼儿因RSV感染的占50％，且RSV的再感染率很高，成人RSV的再感染同样很常见。腺病毒(ADV)易侵犯呼吸道消化道黏膜、眼结膜以及淋巴结等。主要表现为上呼吸道感染，容易侵犯6个月至5岁儿童，占儿童呼吸道感染5％～20％。肺炎支原体(MP)是造成人类支原体肺炎的病原体，是儿童和成人社区获得性肺炎的常见病原体。肺炎衣原体(CP)可引起急慢性呼吸道疾病，社区获得性肺炎、支气管炎和鼻窦炎。

目前，新型冠状病毒(2019-nCoV)在中国的感染病死率约为2.1％，然而新型冠状病毒的传染性极强，远远超过SARS-CoV和MERS-CoV。面对当前新型冠状病毒在中国乃至世界蔓延的势头，人类却缺乏有效的抗病毒疫苗和特效药物，当前对感染者或携带者准确检测诊断对于疫情控制具有至关重要的作用及意义。

以上呼吸道感染的病原体在早期临床表现较为相似，患者均表现为发热，并伴有呼吸道感染症状，依靠临床症状进行鉴别诊断难度较大，在无病原学资料的情况下临床对呼吸道感染疾病盲目使用抗生素的现象非常普遍。因此，应用灵敏度与特异性较好的诊断技术对呼吸道感染疾病的病原体进行检测，对疾病的早期诊断、早期治疗、早期隔离至关重要。然而，在在呼吸道感染的临床检测中，单一检测一种呼吸道感染的病原体，费时、费力、检测成本高。目前，多重检测主要基于免疫学方法的抗原或者抗体检测，而免疫学方法灵敏度和特异性较低，且抗体检测存在窗口期，对疾病早期诊断易漏诊。

因此，建立一种基于核酸技术对新冠病毒和流感病毒等其他呼吸道病毒区别检测诊断的方法，对于实现患者的精准诊断及后续的精准治疗具有重要指导意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有关于新冠病毒和流感病毒等其他呼吸道病毒区别检测诊断技术的缺陷和不足，提供一种呼吸道感染病原体核酸联合检测试剂盒。

本发明的目的是提供一种呼吸道感染病原体核酸联合检测引物与探针组合。