[发明专利]一种匹可硫酸钠半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了匹可硫酸钠半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用，首先制备匹可硫酸钠半抗原PC1、PC2、PC3、PC4，应用半抗原偶联载体蛋白得到人工抗原，免疫动物获得匹可硫酸钠抗体。优选的PC1‑乳铁蛋白偶联物作为免疫原，免疫所获抗体对匹可硫酸钠具有高灵敏度和高特异性的识别能力，IC₅₀为5ng/mL，对结构类似物的交叉反应率均低于10％。本发明公开了匹可硫酸钠酶联免疫检测试剂盒、胶体金免疫层析检测试剂盒及其在食品和/或含保健品中的应用。

技术领域

本发明涉及食品和/或保健品安全检测技术领域，更具体地，涉及一种匹可硫酸钠半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用。

背景技术

匹可硫酸钠(Sodium Picosulfate)是一种刺激性泻药，通过刺激肠道蠕动、分泌，并可抑制肠腔内水分吸收，达到治疗便秘的作用。由于其具有显著的润肠通便功效，有些不法商家为了达到减肥、健美等效果，在酵素食品或声称具有减肥功能的保健食品中添加匹可硫酸钠，然而，长期食用过量的匹可硫酸钠可能会引起肠道系统紊乱或胃黏膜急性损伤。

目前，应用于食品中匹可硫酸钠的最常规的检测方法主要是高效液相色谱- 串联质谱(HPLC-MS/MS)法。公开号为CN110501438A的中国专利《一种减肥茶中匹可硫酸钠的检测方法》公开了一种运用三重四级杆串联质谱法检测减肥茶中匹可硫酸钠的方法。然而，这种方法虽然可以对样品中匹可硫酸钠进行精确定量，而且结果稳定，但存在前处理相对复杂、检测周期长、设备昂贵、对操作人员有一定专业要求等不足，难以实现现场快速检测的目的。因此，急需开发出一种快速、简单的减肥保健食品中匹可硫酸钠的快速检测方法。

相比于现有基于色谱的方法，基于抗原-抗体特异性分子识别的免疫检测方法，在现场检测方面具有更大优势，表现出快速、灵敏、简便等特点，并且成本低廉，对操作人员技能要求较低。免疫分析方法研发的关键在于设计出合适的匹可硫酸钠半抗原、制备出灵敏度高、特异性强的抗体，但是现有技术中还未见有关于匹可硫酸钠半抗原、人工抗原、抗体的相关报道。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术中存在的上述缺陷和不足，提供两种匹可硫酸钠半抗原。

本发明的第二个目的在于提供两种匹可硫酸钠人工抗原。

本发明的第三个目的在于提供一种匹可硫酸钠抗体。

本发明的第四个目的在于提供一种用于免疫检测匹克硫酸钠的人工抗原组。

本发明的第五个目的在于提供一种匹可硫酸钠免疫检测试剂盒。

一种匹可硫酸钠半抗原，其特征在于，所述匹可硫酸钠半抗原的结构式如式 (I)或式(III)所示：

所述式(I)的匹可硫酸钠半抗原采用系统命名法命名为4-((4-(羧基甲氧基) 苯基)(吡啶-2-基)甲基)苯基硫酸钠；

所述式(III)的匹可硫酸钠半抗原采用系统命名法命名为4-((4-((5-羧基戊基)氧基)苯基)(吡啶-2-基)甲基)苯基硫酸钠。

作为一种优选地可实施方式，所述4-((4-(羧基甲氧基)苯基)(吡啶-2- 基)甲基)苯基硫酸钠(PC1)的制备方法为：以无水二氯甲烷作为溶剂，将2- (4-((4-羟苯基)(吡啶-2-基)甲基)苯氧基)乙酸乙酯与三乙胺混合，加入氯磺酸，在室温搅拌下反应，分离纯化得4-((4-(2-乙氧基-2-氧乙氧基)苯基) (吡啶-2-基)甲基)苯基硫酸。再将4-((4-(2-乙氧基-2-氧乙氧基)苯基)(吡啶-2-基)甲基)苯基硫酸溶解于甲醇，再加入1mol/L的氢氧化钠水溶液在室温下搅拌反应3～5h，反应结束后用浓度为1mol/L的盐酸调节pH为6～7，即得4-((4-(羧基甲氧基)苯基)(吡啶-2-基)甲基)苯基硫酸钠(PC1)。