[发明专利]一种用于培养DF-1细胞的无血清培养基及其制备方法在审
申请号: | 202011101169.8 | 申请日: | 2020-10-15 |
公开(公告)号: | CN112210542A | 公开(公告)日: | 2021-01-12 |
发明(设计)人: | 王洪林;刘志亮;孙友君;范娜娜;宋桂才;张恒;卢博;王稼林;马广斌;鹿洪伟;王月华;邹海涛 | 申请(专利权)人: | 山东信得动物疫苗有限公司;山东诸子生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N7/00;C12R1/93 |
代理公司: | 北京同辉知识产权代理事务所(普通合伙) 11357 | 代理人: | 于晶晶 |
地址: | 262200*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 培养 df 细胞 血清 培养基 及其 制备 方法 | ||
1.一种用于培养DF-1细胞的无血清培养基,其特征在于,包括氨基酸、维生素、盐类、脂类、微量元素、缓冲剂、蛋白水解物、酸碱指示剂和其他添加组分,其中,
所述氨基酸为丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸;
所述维生素为生物素、叶酸、烟酰胺、吡哆醇、硫胺素和硫辛酸;
所述盐类为氯化镁、硫酸镁、氯化钙、氯化钾、氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和丙酮酸钠;
所述脂类为胆固醇、生育酚醋酸酯、豆蔻酸、棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、吐温和嵌段式聚醚F68;
所述微量元素为硫酸铜、硝酸铁、硫酸亚铁和亚硒酸钠;
所述缓冲剂为碳酸氢钠和羟乙基哌嗪乙磺酸;
所述蛋白水解物为大豆水解物和小麦水解物;
所述酸碱指示剂为酚红;
所述其他添加组分为葡萄糖、次黄嘌呤和胸苷。
2.根据权利要求1所述的用于培养DF-1细胞的无血清培养基,其特征在于,所述氨基酸中各成分的终浓度分别为丙氨酸4~8毫克/升、精氨酸100~200毫克/升、天冬酰胺6~20毫克/升、天冬氨酸9~16毫克/升、胱氨酸15~25毫克/升、半胱氨酸20~35毫克/升、谷氨酸7~15毫克/升、谷氨酰胺200~800毫克/升、甘氨酸10~25毫克/升、组氨酸20~50毫克/升、异亮氨酸30~60毫克/升、亮氨酸50~70毫克/升、赖氨酸100~150毫克/升、甲硫氨酸15~30毫克/升、苯丙氨酸30~50毫克/升、脯氨酸15~30毫克/升、丝氨酸20~40毫克/升、苏氨酸30~60毫克/升、色氨酸15~30毫克/升、酪氨酸40~70毫克/升、缬氨酸40~70毫克/升;
所述维生素中各成分的终浓度分别为生物素0.003~0.01毫克/升、叶酸2~5毫克/升、烟酰胺5~10毫克/升、吡哆醇2~5毫克/升、硫胺素2~5毫克/升、硫辛酸0.2~0.5毫克/升;
所述盐类中各成分的终浓度分别为氯化镁30~100毫克/升、硫酸镁30~100毫克/升、氯化钙150~200毫克/升、氯化钾300~500毫克/升、氯化钠1000~6000毫克/升、磷酸氢二钠50~100毫克/升、磷酸二氢钠50~100毫克/升、丙酮酸钠60~150毫克/升;
所述脂类中各成分的终浓度分别为胆固醇2~5毫克/升、生育酚醋酸酯0.005~0.01毫克/升、豆蔻酸0.005~0.01毫克/升、棕榈酸0.005~0.01毫克/升、棕榈油酸0.005~0.01毫克/升、硬脂酸0.005~0.01毫克/升、吐温80 1~3.0毫克/升、嵌段式聚醚F6810~2000毫克/升;
所述微量元素中各成分的终浓度分别为硫酸铜10~20毫克/升、硝酸铁50~100毫克/升、硫酸亚铁0.1~0.6毫克/升、亚硒酸钠80~150毫克/升;
所述缓冲剂中各成分的终浓度分别为碳酸氢钠1000~3700毫克/升、羟乙基哌嗪乙磺酸1000~5000毫克/升;
所述酚红的终浓度为5~10毫克/升;
所述蛋白水解物中各成分的终浓度分别为大豆水解物2000~4000毫克/升、小麦水解物2000~4000毫克/升;
所述其他添加组分中各成分的终浓度分别为葡萄糖2000~6000毫克/升、次黄嘌呤5~10毫克/升、胸苷0.1~0.8毫克/升。
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