[发明专利]一种基于脂质组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法

权利要求书

1.一种基于脂质组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法，其特征在于：

利用茯茶脂质组学研究甘油三酯(15:1/18:3/18:3)与甘油二酯(18:3/20:3)含量的比值对同一加工条件下制作的原料未知的茯茶进行种类判别，待测品种中甘油三酯(15:1/18:3/18:3)与甘油二酯(18:3/20:3)含量的比值在1.0以上的为略阳杜仲茯茶样品，甘油三酯(15:1/18:3/18:3)与甘油二酯(18:3/20:3)含量的比值在0.5以下的为安化黑毛茯茶样品。

2.根据权利要求1所述的一种基于脂质组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法，其特征在于：

具体方法为：

首先制备茯茶样品提取液，然后采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道肼高分辨质谱的脂质组学分析方法对茯茶样品中的甘油三酯(15:1/18:3/18:3)与甘油二酯(18:3/20:3)进行相对定量分析，计算甘油三酯(15:1/18:3/18:3)与甘油二酯(18:3/20:3)含量的比值，待测样本中甘油三酯(15:1/18:3/18:3)与甘油二酯(18:3/20:3)含量的比值在1.0及以上的为略阳杜仲茯茶样品，甘油三酯(15:1/18:3/18:3)与甘油二酯(18:3/20:3)含量的比值在0.5以下的为安化黑毛茯茶样品。

3.根据权利要求2所述的一种基于脂质组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法，其特征在于：

所述茯茶样品提取液的制备方法为：将茶样于-80 ℃冰箱取出，置于冷冻干燥机干燥，采用高速粉碎机对茶样进行粉碎；称取茶样20 mg于离心管中，加入300 μL甲醇溶液和1 mLMTBE，摇匀涡旋1 h后，加入300 μL H2O涡旋30 s，在4 ℃下静置10 min，14000 r·min-1转速离心10 min，取500 μL上清液冻干，于-80 ℃保存；进样分析前，复溶于100 μL的乙腈/异丙醇/水=65/30/5（v/v/v）溶液中，涡旋3 min，以14000 r·min-1转速在10 ℃下离心10min，取上清液于进样瓶中。

4.根据权利要求3所述的一种基于脂质组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法，其特征在于：

所述色谱的检测条件为：采用Thermo Fisher的DionexUltiMate 3000 UPLC system系统和色谱柱C8 AQUITY，规格为2.1×100 mm×1.7 μm，进行LC分离；主要参数如下：所用流动相为：流动相A为含10 mM乙酸铵的乙腈水溶液，溶液中ACN:H₂O=6:4，流动相B为含10 mM乙酸铵的异丙醇乙腈溶液，溶液中IPA:ACN=9:1；洗针液为IPA:ACN:H₂O=65:30:5的溶液；流速：0.26 mL min^-1；柱温：55 ℃；进样体积：5-10 μL；进样室温度：10 ℃；洗脱梯度：0 min68%A、1.5 min 68%A、15.5 min 15%A、15.6 min 3%A、18 min 3%A、18.1 min 68%A、20 min68%A。

5.根据权利要求4所述的一种基于脂质组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法，其特征在于：

所述质谱的检测条件为：UHPLC系统经电喷雾离子化源（ESI）与Q ExactiveOrbitrap质谱相连；分别采用正、负离子模式采集数据，鞘气35 arb，辅助气5 arb，毛细管电压3 kV，离子传输管温度为320 ℃；质谱全扫模式下，仪器分辨率设置为120000，扫描范围为150-1600m/z，阶梯碰撞能量：15、30、45 EV。