[发明专利]一种基于茯茶代谢组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法有效
申请号: | 202011103995.6 | 申请日: | 2020-10-15 |
公开(公告)号: | CN112229931B | 公开(公告)日: | 2022-06-21 |
发明(设计)人: | 赵燕妮;陈丹;李悦;任嘉敏;张坤;曾乔;秦俊哲;胡歆;梁艳 | 申请(专利权)人: | 陕西科技大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86 |
代理公司: | 西安新思维专利商标事务所有限公司 61114 | 代理人: | 李罡 |
地址: | 710021*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 代谢 黑毛茯茶 杜仲 区别 方法 | ||
1.一种基于茯茶代谢组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法,其特征在于:
利用茯茶代谢组学方法研究茯茶中山奈酚和芦丁含量的比值对不同原料在同一加工条件下制作的茯茶样本进行判别,待测样本中山奈酚和芦丁比值在0.51以上的为安化黑毛茯茶样本,山奈酚和芦丁比值在0.06以下的为略阳杜仲茯茶样本。
2.根据权利要求1所述的一种基于茯茶代谢组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法,其特征在于:
具体方法如下:
首先制备茯茶样品提取液,然后采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道肼高分辨质谱的代谢组学分析方法对茯茶样品中的山奈酚和芦丁进行相对定量分析,计算山奈酚和芦丁含量的比值,待测样本中山奈酚和芦丁含量的比值在0.06及以下的为略阳杜仲茯茶样品,山奈酚和芦丁含量的比值在0.51以上的为安化黑毛茯茶样品。
3.根据权利要求2所述的一种基于茯茶代谢组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法,其特征在于:
所述茯茶样品提取液的制备方法为:将茯茶碾碎,置于冷冻干燥机干燥,采用高速粉碎机对茶样进行粉碎;称取茶样50 mg于离心管中,加入1.5 mL 浓度为80%的甲醇水,涡旋5min,在4℃下,以14000 r·min-1转速离心10 min,取上清液500 μL,放入冷冻离心浓缩仪中冻干,于-80℃保存。
4.根据权利要求3所述的一种基于茯茶代谢组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法,其特征在于:
所述液相色谱的检测条件为:采用ThermoFisher的DionexUltiMate3000UPLCsystem系统和Waters的C8AQUITY色谱柱,规格为2.1×100mm×1.7μm,进行LC分离;主要参数如下:所用流动相为:流动相A为含0.1%甲酸的水溶液,流动相B为含0.1%甲酸的乙腈溶液;流速:0.35 mL/min;柱温:50 ℃;进样体积:5-10μL;进样室温度:4 ℃;梯度洗脱条件为:0-24min,95% A;24-28.1 min,0% A;28.1-30 min,95% A,总洗脱时间为30 min。
5.根据权利要求4所述的一种基于茯茶代谢组学的黑毛茯茶与杜仲茯茶的区别方法,其特征在于:
所述质谱的检测条件为:UHPLC系统经电喷雾离子化源(ESI)与QExactiveOrbitrap质谱相连;分别采用正、负离子模式采集数据,鞘气35arb,辅助气5arb,毛细管电压3 kV,离子传输管温度为320℃;质谱全扫模式下,仪器分辨率设置为120000,扫描范围为80-1200 m/z,阶梯碰撞能量:15、30、45 EV。
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