[发明专利]一种基于活性巯基和报告离子的亲电分子探针及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于活性巯基和报告离子的亲电分子探针，其特征在于，其结构式如式(I)所示：

2.权利要求1所述的基于活性巯基和报告离子的亲电分子探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1.在反应容器中加入化合物A、化合物B和多肽缩合试剂在溶剂中进行缩合反应，反应结束后，分离纯化得到白色固体中间体C，其化学反应方程式如下所示：

S2.在反应容器中加入溶剂和中间体C，再加入强碱溶液发生水解反应，反应完成后，加入盐酸水溶液，之后将体系旋干，油泵干燥，重新加入溶剂搅拌，有白色固体析出，抽滤，滤液经两次旋干，合并得白色固体中间体D，其化学反应方程式如下所示：

S3.在反应容器中加入中间体D、二硫代-4,4'-二氨基代二苯和多肽缩合试剂在溶剂中进行缩合反应，反应完成后，抽滤，滤饼用溶剂淋洗，滤液旋干，层析得红色油状中间体F，其化学反应方程式如下所示：

S4.在反应容器中加入溶剂、中间体F、二硫键还原剂和水，无氧条件下反应，反应完成后抽滤，滤液中分离纯化得到白色固体probe，即为式(I)所示基于活性巯基和报告离子的亲电分子探针，其化学反应方程式如下所示：

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤S1所述化合物A、化合物B的摩尔比为1:1。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤S1所述缩合反应为23～27℃反应2～3h。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤S2所述中间体C和强碱的摩尔比为1:1.5～2。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤S2、S3和/或S4所述反应为15～20℃反应过夜。

7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤S3所述中间体D和二硫代-4,4'-二氨基代二苯的摩尔比为1:0.5～1。

8.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤S4所述中间体F和二硫键还原剂的摩尔比为1:2。

9.权利要求1所述的基于活性巯基和报告离子的亲电分子探针在检测天然产物或者动植物细菌细胞，组织或器官提取物中活性亲电分子中的非疾病诊断和治疗用途的应用。

10.一种非疾病诊断和治疗用途的检测天然产物或者细胞中潜在的活性亲电分子的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1.样品前处理在反应容器中，加入天然产物或者细胞提取物，以及本发明式(I)探针化合物、抗坏血酸后，用超干无水甲醇/超干二氯甲烷/超干DMF做溶剂，反应溶剂需事先通入氩气/氮气除氧，惰性气体保护，轻摇或者超声使反应混合物全溶后，通入氩气/氮气除氧，立即旋紧盖子，封上封口膜，常温下搅拌2～40小时后，停止反应，立即旋干或者抽干反应液，用质谱级的甲醇制样，配成0.1-100ppm的待测样品溶液；

S2.对步骤S1的待测样品溶液进行液相色谱-高分辨多级质谱检测，进行色谱图，质谱一级谱与质谱二级或多级质谱分析，以检测，发现天然产物或者细胞中潜在的活性亲电分子，并确定目标分子的精确分子量，质量差小于1-10ppm，同位素特征和可能的准确分子式；并明确目标化合物在相应液相色谱条件下的色谱性质、出峰时间。