[发明专利]重组HVT及其用途

说明书

本发明涉及重组HVT及其用途。具体地，本发明涉及包含编码至少两种不同抗原的重组核苷酸序列的重组疱疹病毒。本发明特别适合用于生产疫苗，以免疫接种禽类物种对抗禽类病原体。

技术领域

本发明涉及编码不同抗原的重组禽疱疹病毒及其用途。本发明适合用于生产疫苗以免疫接种禽类物种对抗禽类病原体。

背景技术

家禽的肉和蛋是重要的食物来源，它们的消费量由于人口的增长和它们极高的品质价格比而持续增加。为了确保家禽健康和食品安全，家禽疫苗技术已成为全球关注的问题。

表达病原体蛋白的病毒载体通常被用作家禽疫苗以对抗靶病原体。包括此类病毒载体的疫苗诱导外来病原体蛋白在被感染宿主中表达，这可能导致保护性免疫。

已经调查了许多不同类别的病毒作为用于禽类疫苗接种的候选载体，例如腺病毒、AAV、禽痘病毒、疱疹病毒等。

已经确定了三种类型的疱疹病毒，即MDV1、MDV2和MDV3(也被称为火鸡疱疹病毒(HVT))。在所述病毒之间存在高相似性(参见Kingham等，Journal of General Virology(2001)82,1123-1135)，并且它们都已被用于制备其中整合有源自于病原体的外来基因的重组病毒，以在禽类、特别是家禽例如鸡中用作疫苗。

尽管此类疫苗制剂对于疫苗接种禽类物种以对抗许多疾病提供了高效结果，但在用各自编码不同抗原的两种或更多种重组疱疹病毒注射禽类时，可能发生病原体之间的竞争和免疫抑制。

为了克服这种干扰并且也为了便于疫苗接种以对抗多种疾病，已做出了各种不同尝试来生产编码几种抗原的多价疱疹病毒。

第一批研究将几个基因插入到疱疹病毒基因组中的单一克隆位点中(参见例如EP1026246)。然而，此类构建物或者不提供所需的保护性免疫水平，或者被证明是不稳定的，在培养细胞中重复传代期间失去所有或一部分外来基因。

WO2013/144355和WO2020/127964报道了编码多种外来抗原的稳定的疱疹病毒，其使用位于病毒基因组的非编码区中的克隆位点的组合来获得。

WO2013/057236、WO2013/082327和WO2013/082317报道了设计多价HVT的另一种方法，其包括将至少一个基因克隆到疱疹病毒的US2编码序列内。

考虑到病原体和物种的数量，在本领域中对能够在体内稳定地表达多个基因并且适合于禽类、特别是家禽的疫苗接种的其他重组多价疱疹病毒，存在着需求。

发明内容

本发明提供了新的抗原和重组禽疱疹病毒。

具体来说，本发明提供了有效产生针对禽流感病毒的免疫应答的新的抗原。本发明还提供了编码所述抗原的核酸分子、含有所述核酸的载体、以及含有此类抗原和/或核酸和/或载体的疫苗。

本发明还提供了重组火鸡疱疹病毒(HVT)，其包含编码具有选自SEQ ID NO：1-6中的任一者的氨基酸序列的血凝素(HA)蛋白或其免疫原性片段或变体的核苷酸序列。优选地，所述核苷酸序列被插入到所述病毒基因组的非编码区中，所述非编码区更优选地选自UL45与UL46之间的非编码区和SORF3与US2之间的非编码区。

本发明还提供了重组火鸡疱疹病毒(HVT)，其包含：(i)插入到所述病毒基因组的第一插入位点中，编码具有选自SEQ ID NO：1-6中的任一者的氨基酸序列的血凝素(HA)蛋白或其免疫原性片段或变体的核苷酸序列；和(ii)插入到所述病毒基因组的第二插入位点中，编码新城疫病毒的F蛋白或其免疫原性片段或变体的核苷酸序列，所述第一和第二插入位点位于所述病毒基因组的选自以下的不同非编码区中：在UL45与UL46之间的非编码区、以及在SORF3与US2之间的非编码区。