[发明专利]一种新型冠状病毒S蛋白的B细胞线性抗原表位、抗体、鉴定方法及应用

说明书

本发明适用于生物学技术领域，提供了一种新型冠状病毒S蛋白的B细胞线性抗原表位、抗体、鉴定方法及应用，其中，所述S蛋白的B细胞线性抗原表位的氨基酸序列为如SEQ ID NO.104或SEQ ID NO.82所示，本发明提供了全新的新型冠状病毒S蛋白的B细胞线性抗原表位，可以用于检测COVID‑19患者血液中的特定抗体，也可以用于接种健康人群从而诱导产生特异性的抗体，从而为SARS‑CoV‑2疫苗设计、单克隆抗体研发以及抗体检测试剂盒的研发提供重要的抗原靶点。

技术领域

本发明属于生物学技术领域，尤其涉及一种新型冠状病毒S蛋白的B细胞线性抗原表位、鉴定方法及应用。

背景技术

2019年12月暴发的新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019，COVID-19)，病原体为SARS-CoV-2(severe acute respiratory syndrome corona virus2)。COVID-19已经成为全球性大流行病，疫情已经发展至200多个国家且形势严峻。

SARS-CoV-2全基因组长度大约为29.8kb核苷酸，编码四种主要的结构蛋白：棘突蛋白S(Spike protein，S蛋白)、膜蛋白M(Membrane protein)、包膜蛋白E(Envelopeprotein)和核衣壳蛋白N(Nucleocapsid)。其中，SARS-CoV-2通过S蛋白上的受体结合域(receptor binding domain，RBD)介导病毒与细胞受体结合后，S1与S2亚基被TMPRSS2切割解离。触发S2亚基发生构象改变，使S2亚基包含的融合肽暴露。融合肽锚定靶细胞膜，促进病毒与靶细胞膜融合。同时，S蛋白也是病毒的主要抗原蛋白。因此，SARS-CoV-2 S蛋白是新冠疫苗研发的热门靶抗原。

最近的报道鉴定出了部分SARS-CoV-2 S蛋白B细胞线性表位，提供了一部分SARS-CoV-2的B细胞线性表位分布信息，但截至目前，SARS-CoV-2抗原表位研究资料还很有限，多数报道仅基于软件预测，准确率低。

发明内容

本发明实施例的目的在于提供一种新型冠状病毒S蛋白的B细胞线性抗原表位。

本发明实施例是这样实现的，一种新型冠状病毒S蛋白的B细胞线性抗原表位，所述S蛋白的B细胞线性抗原表位的氨基酸序列为如SEQ ID NO.104或SEQ ID NO.82所示。

本发明实施例的另一目的在于一种新型冠状病毒S蛋白的B细胞线性抗原表位，所述S蛋白的B细胞线性抗原表位的氨基酸序列为如SEQ ID NO.104、SEQ ID NO.128和SEQ IDNO.129所示。

本发明实施例的另一目的在于一种新型冠状病毒S蛋白的B细胞线性抗原表位的鉴定方法，包括：

根据S蛋白的氨基酸序列，设计合成若干肽段组，每个所述肽段组包括若干肽段，所述肽段的氨基酸序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.127所示；

采集恢复期血清或血浆样本，灭活备用；

将所述每个肽段组分别包被ELISA 96孔板，并与所述恢复期血清或血浆样本进行间接酶联免疫反应检测，确定阳性肽段组；

将所述阳性肽段组内的每个肽段分别包被ELISA 96孔板，继续与所述恢复期血清或血浆样本逐一进行间接酶联免疫反应检测，确定阳性反应肽段，所述阳性反应肽段的氨基酸序列为权利要求1所述的SEQ ID NO.104和SEQ ID NO.82。

本发明实施例的另一目的在于一种新型冠状病毒抗体，所述新型冠状病毒抗体是采用权利要求1所述的B细胞线性抗原表位的氨基酸序列偶联惰性蛋白，按照免疫程序免疫动物获得的抗性血清。

本发明实施例的另一目的在于一种检测新型冠状病毒的试剂盒，所述试剂盒包括所述的B细胞线性抗原表位。