[发明专利]一种脂肪干细胞的分离方法在审
申请号: | 202011115044.0 | 申请日: | 2020-10-19 |
公开(公告)号: | CN112175902A | 公开(公告)日: | 2021-01-05 |
发明(设计)人: | 李青峰;周双白;张晓杰 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学医学院附属第九人民医院 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;C12N13/00;A61K35/28;A61P17/02;A61P17/18;A61P19/02;A61P29/00;A61P9/00 |
代理公司: | 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 | 代理人: | 许亦琳;余明伟 |
地址: | 200011 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 脂肪 干细胞 分离 方法 | ||
1.一种脂肪干细胞的分离方法,其特征在于,所述分离方法包括将脂肪组织与质量体积比为0.05~0.3%的胶原酶混合后,再进行超声处理。
2.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述脂肪组织选自动物脂肪组织或人脂肪组织。
3.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述胶原酶选自单一类型的胶原酶或混合型的胶原酶。
4.根据权利要求3所述的分离方法,其特征在于,所述单一类型的胶原酶为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型中的任一种;所述混合型的胶原酶为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型中的几种类型的组合。
5.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述脂肪组织与胶原酶的体积比为1:0.8~1:2.0。
6.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述超声处理的功率选自50~200W。
7.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述超声处理的时间为30~150秒。
8.根据权利要求1所述的分离方法,其特征在于,所述分离方法还包括以下步骤:
1)将超声处理后的混合液置于摇床中继续消化,至消化成均匀混悬液;
2)将消化后获得的混悬液离心,弃上层脂肪细胞和中间的液体,保留底层的脂肪干细胞团;
3)用磷酸缓冲盐溶液或生理盐水洗涤脂肪干细胞团,洗涤后重悬即获得脂肪干细胞单细胞悬液。
9.根据权利要求8所述的分离方法,其特征在于,步骤1)中,所述摇床的温度为35~37℃,继续消化时间为20~30分钟。
10.权利要求1-9任一所述的分离方法获得的脂肪干细胞在制备治疗促进急慢性创面愈合、治疗皮肤老化、促进皮肤再生、治疗关节退行性变或血管病变产品中的用途。
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