[发明专利]一种鉴别掺假蜂蜜的方法

说明书

本发明涉及一种鉴别掺假蜂蜜的方法，所述方法包括如下步骤：(1)样品预处理；(2)使用离子色谱‑脉冲安培检测器测定样品中是否含有D‑阿洛酮糖；所述的蜂蜜掺假指在蜂蜜中掺有含D‑阿洛酮糖的糖浆；步骤(2)的具体方法为：将待测液用离子色谱‑脉冲安培检测法对D‑阿洛酮糖进行分离和检测，利用保留时间对样品中D‑阿洛酮糖进行定性，使用外标法通过外标标准曲线法对样品中D‑阿洛酮糖进行定量。

技术领域

本发明属于生物化学技术领域，具体的，涉及一种鉴别掺假蜂蜜的方法。

背景技术

D-阿洛酮糖(D-psicose/D-allulose)又名D-核糖-2-己酮糖，化学式为C6H12O6，相对分子质量180.156，CAS号551-68-8，IUPAC名为(3R’4R’5R)-1’3’4’5’6-pentahydroxyhexan-2-one，熔点109℃，沸点551.7±50.0℃，易溶于水、甲醇、乙醇等。

D-阿洛酮糖是一种天然存在的稀有单糖，是D-果糖C-3位的差向异构体，存在于小麦、鼠刺属植物、压榨过的甘蔗渣、甜菜糖蜜等物质中，在商品D-葡萄糖、D-果糖中也有少量存在。D-阿洛酮糖在食品与医疗方面具有巨大应用潜力。食品方面，D-阿洛酮糖作为新型甜味剂具有蔗糖70％甜度，却只有蔗糖热量的0.3％，能够使食品保持甜度的同时改善食品的质构、风味和口感，还能有效减少能量摄入；医疗方面，D-阿洛酮糖具有抑制食欲、调控血糖、保护神经、保护先天免疫系统等生理功能。D-阿洛酮糖已于2014年通过美国FDA安全认证，于2015年获得了GRAS认证。

天然蜂蜜中一般不含有D-阿洛酮糖，而在某些糖浆的工艺生产中，D-阿洛酮糖会成为加工副产物，近年来市场上存在将糖浆掺入蜂蜜来冒充天然蜂蜜的情况，因而采用阿洛酮糖作为靶标检测蜂蜜中的糖浆掺假成为一种有潜力的研究思路。

目前针对D-阿洛酮糖的检测方法研究较少，已有旋光法和液相色谱-蒸发光检测器法，旋光法根据在同一温度条件下D-阿洛酮糖浓度与旋光值具有线性关系而对其含量进行检测，该方法简便快速但应用范围狭窄，灵敏度低；液相色谱-蒸发光检测器法基于样品颗粒对光的散射与质量呈指数关系的特点，应用于D-阿洛酮糖的检测，该方法相对于旋光法灵敏度、精确度较高，但该方法有机试剂用量大，且前处理较为繁琐。

目前尚未见采用离子色谱-脉冲安培检测法对D-阿洛酮糖含量进行检测的报道。

发明内容

本发明首先涉及一种通过检测D-阿洛酮糖来鉴定蜂蜜掺假的方法，所述方法包括如下步骤：

(1)样品预处理；

(2)使用离子色谱-脉冲安培检测器测定样品中是否含有D-阿洛酮糖；

所述的蜂蜜掺假指在蜂蜜中掺有含D-阿洛酮糖的糖浆；

步骤(1)的具体方法为：

称取蜂蜜样品1～2g于烧杯中，加适量去离子水溶解混匀，转移至容量瓶中，使用去离子水定容并混匀，并过0.22μm滤膜除菌后，按照500-2000倍的稀释倍数进行稀释，稀释液待测；优选的，稀释倍数为2000倍，所述的稀释倍数为：1克蜂蜜样品对应的水的体积量，水的体积单位为毫升。

步骤(2)的具体方法为：

将待测液用离子色谱-脉冲安培检测法对D-阿洛酮糖进行分离和检测，利用保留时间对样品中D-阿洛酮糖进行定性，使用外标法通过外标标准曲线法对样品中D-阿洛酮糖进行定量；

所述离子色谱-脉冲安培检测器的具体检测条件为：

1)色谱柱：Dionex Carbopac PA10(250mm×4mm)；含保护柱：Carbopac PA10Guars(50mm×4mm)

2)工作电极：Gold

3)参比电极：Ag/AgCl