[发明专利]一种通过电导率测定动物活疫苗中病毒含量的方法

说明书

本发明涉及疫苗检测技术领域，尤其是一种通过电导率测定动物活疫苗中病毒含量的方法，具体是将若干份已知病毒含量的病毒液进行系列稀释，用电导率仪进行检测，经过修正，得到标准曲线，得到病毒含量与电导率的关系公式；然后对待测样品测得电导率后，根据关系公式计算出实际的病毒含量。此检测方法具有时间短、操作容易、干扰因素少等优点，且经过生产实践检验，该检测方法切实可行。

技术领域

本发明涉及疫苗检测技术领域，具体领域为一种测定动物活疫苗中病毒含量的方法。

背景技术

兽用生物制品的效力检测的原理是根据生物制品制造使用的微生物自身的特点，可致细胞病变，可以使鸡胚发生感染或死亡，或者接种后动物血清中抗体能够达到相关水平等方法进行的。评价病毒含量使用的技术指标为：EID₅₀/羽份、ELD₅₀/羽份、TCID₅₀/头份、LD₅₀/羽份、ID₅₀/羽份，即可使半数动物（鸡胚、细胞）发生感染或死亡的病毒含量来评价的。具体操作中采用对制品（或动物血清）进行系列稀释，接种细胞、鸡胚或者进行相关实验后，根据病变情况进行累计计算，按Reed-Muench法计算，得到最终结果。

但是采用上述方法检测的是精确的病毒含量，耗时长，在生产实践中难以使用。因为检测时间长，需要增加保存设备。因此，快速检测病毒含量，以便在接下来的工序中根据该数据进行下道工序操作，例如：分装，灭活等，就显得非常重要。

因此，亟需开发一种对病毒液中的病毒含量进行快速检测的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种通过电导率测定动物活疫苗中病毒含量的方法。通过对病毒液电导率的检测，严格制定了数学模型来准确的测定病毒含量，满足了实际生产快速检测的需求。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种通过电导率测定动物活疫苗中病毒含量的方法：将若干份已知病毒含量的病毒液进行系列稀释，用电导率仪进行检测，经过修正，得到标准曲线，得到病毒含量与电导率的关系公式；然后对待测样品测得电导率后，根据关系公式计算出实际的病毒含量。

具体的，将若干份已知病毒含量的病毒液进行系列稀释，室温下用电导率仪进行检测，建立电导率和不同的稀释倍数的对数之间的数学模型，选取R²值最接近1的曲线作为第一标准曲线，用所述第一标准曲线对其他的已测结果进行数据修正，得出经修正的稀释倍数的对数；然后建立经修正的稀释倍数的对数与病毒含量之间的数学模型，即第二标准曲线；根据第一标准曲线公式和第二标准曲线公式得到病毒含量与电导率的关系公式；

对待测样品，经适当的稀释后，测得电导率，然后代入关系公式中，计算得出实际的病毒含量。

进一步的，所述已知病毒含量的病毒液的数量至少为5份。

其中，所述第一标准曲线的横坐标为稀释倍数的对数；纵坐标为电导率，单位为μs/cm。

其中，所述第二标准曲线的横坐标为经修正的稀释倍数的对数；纵坐标为病毒含量，单位为TCID₅₀/头份。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明的测定方法时间短，操作简便，干扰因素少。虽然该方法最终计算的结果与细胞法检测的精确结果存在一定的误差，但是该结果已能够满足生产实践的需要，切实可行。

附图说明

图1为实施例2中电导率和稀释倍数的对数之间的关系曲线；

图2为实施例2中第二标准曲线。

具体实施方式