[发明专利]一种海栖热袍菌纤维寡糖转运蛋白、其编码基因及应用有效
申请号: | 202011123907.9 | 申请日: | 2020-10-20 |
公开(公告)号: | CN112239489B | 公开(公告)日: | 2021-06-25 |
发明(设计)人: | 汤宏赤;闭德武;郭媛;庞浩;刘艺;林丽华;周冰清 | 申请(专利权)人: | 广西科学院 |
主分类号: | C07K14/195 | 分类号: | C07K14/195;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22;C12N15/31;C12N15/70;C12P19/14;C12P19/12;C12P19/04;C12P19/00 |
代理公司: | 北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙) 11562 | 代理人: | 张换君 |
地址: | 530007 广西*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 海栖热袍菌 纤维 寡糖 转运 蛋白 编码 基因 应用 | ||
1.一种海栖热袍菌纤维寡糖转运蛋白在纤维寡糖发酵中的应用,其特征在于,所述海栖热袍菌纤维寡糖转运蛋白的氨基酸序列如 SEQ ID NO.1 所示,所述的纤维寡糖包括纤维二糖、纤维三糖、纤维四糖、纤维五糖中的一种或多种。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述海栖热袍菌纤维寡糖转运蛋白的编码基因的 DNA 序列如 SEQ ID NO.2 所示。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述海栖热袍菌纤维寡糖转运蛋白的制备方法具体包括如下步骤:
(1)pET-Tma-cbtA 重组表达质粒的构建;
(2)重组底物结合蛋白的表达:将步骤(1)所述重组表达质粒转化至大肠杆菌中,培养基因工程菌、诱导重组底物结合蛋白表达;
(3)纯化步骤(2)所得的重组底物结合蛋白;
(4)将步骤(3)所得纯化重组底物结合蛋白的洗脱液透析除盐,得到纯的重组底物结合蛋白。
4.根据权利要求 3 所述的应用,其特征在于,步骤(2)所述基因工程菌在含卡那霉素以及氯霉素的培养基中培养,采用的诱导剂为 IPTG。
5.根据权利要求 3 所述的应用,其特征在于,所述基因工程菌的转化方法为氯化钙-氯化镁法。
6.根据权利要求 3 所述的应用,其特征在于,所述纯化重组底物结合蛋白的方法为亲和层析法。
7.根据权利要求 1 所述的应用,其特征在于,所述的纤维寡糖为纤维五糖。
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