[发明专利]一种制备小鼠类风湿性关节炎模型的方法

说明书

本发明公开了一种制备小鼠类风湿性关节炎模型的方法，属于医药技术领域。该方法具体是先将鸡Ⅱ型胶原充分乳化，然后以年龄5~7周的SPF级DBA1/J雄性小鼠为模型动物，第1天在小鼠尾根部多点注射，第21天腹腔注射，第28天腹腔注射脂多糖溶液。此方法可操作性强，造模成功率高，可实现稳定高效制备小鼠类风湿性关节炎动物模型的目的。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种制备小鼠类风湿性关节炎模型的方法。

背景技术

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA) 是一种以多关节慢性炎症和关节破坏损伤为主要表现的全身性常见自身免疫性疾病。RA动物模型可以模拟疾病的发病过程，有助于了解RA的发病机制，为预防和治疗提供重要依据。

目前，RA 的动物模型有多种，但各类模型均有缺陷。如：（1）佐剂性关节炎模型，此类模型造模多采用大鼠，在组织病理学特征上与RA有较大差别；（2）卵蛋白和蛋白多糖等诱导的关节炎模型，发病过程主要是关节内抗原的持续刺激，形成抗原-抗体复合物，其发病机制与RA也不尽相同；（3）基因修饰关节炎模型存在周期长、代价高等缺点；（4）胶原诱导的关节炎模型与人类RA发病相似度较高，但该模型制备方法差异较大，注射部位剂量不统一。造成发病时间、临床表现不一。鉴于现有技术中制备RA动物模型的方法中存在的各种缺点，亟需构建一种既能接近人类的RA发病过程，又能提高动物模型成功率，并能稳定表达人类RA病理特征的动物模型。

发明内容

本发明的目的是提供一种制备小鼠类风湿性关节炎模型的方法，该方法可操作性强，造模成功率高。

为了实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案：

一种制备小鼠类风湿性关节炎模型的方法，包括以下步骤：

步骤1，以冰醋酸溶液作为溶剂，配置鸡Ⅱ型胶原溶液；

步骤2，将鸡Ⅱ型胶原溶液与等体积的完全弗式佐剂混合，制成胶原乳剂；

步骤3，取SPF级小鼠，在其尾根部注射胶原乳剂，然后于第21天在腹腔注射胶原乳剂、第28天腹腔注射脂多糖溶液，即可得到类风湿性关节炎小鼠模型。

进一步地，步骤1中是以0.1 mol/L冰醋酸溶液为溶剂，配置浓度为2 mg/mL的鸡Ⅱ型胶原溶液。具体过程为：配置0.1 mol/L 的冰醋酸溶液，称取100µg鸡Ⅱ型胶原，将之溶于50µL冰醋酸溶液中，胶原终浓度为2 mg/mL，在2～8 ℃下轻轻搅拌，4℃放置过夜，使之充分溶解。

进一步地，步骤2的具体过程为：用1mL的无菌注射器吸取上述鸡Ⅱ型胶原溶液，另一支1mL无菌注射器吸取等体积完全弗式佐剂，将两支注射器用医用无菌输液管链接，来回推拉至混合液呈乳白色，进一步混合使充分乳化，形成胶原乳剂。

进一步地，所述过程在冰上进行。

进一步地，步骤3中小鼠的品系为DBA1/J，年龄在5~7周，采用雄性小鼠造模。

进一步地，步骤3中，先在小鼠尾根部注射100µL胶原乳剂，然后于第21天在小鼠腹腔注射100µL胶原乳剂、第28天腹腔注射20µL 1mg/mL的脂多糖溶液。

有益效果：

本发明在原有胶原模型基础上进行改良，通过充分溶解乳化小鼠易感的鸡Ⅱ型胶原，选择小鼠品系为DBA1/J 5~7周的SPF级雄性小鼠，采用尾根部多点、腹腔多次免疫法来制备模型，使关节病理变化更接近于类风湿性关节炎，提高模型成功率，确保模型的可重复性和科学性。

本发明制备小鼠类风湿性关节炎模型的改良方法，具有操作简单，较高程度的模拟人类的类风湿关节炎的病理变化，并且模型成功率、可重复性高。

附图说明