[发明专利]一种应用于克罗恩病和溃疡性结肠炎治疗的干细胞在审
申请号: | 202011128206.4 | 申请日: | 2020-10-21 |
公开(公告)号: | CN112057472A | 公开(公告)日: | 2020-12-11 |
发明(设计)人: | 周自豪;余雷;廉云飞 | 申请(专利权)人: | 江苏拓弘康恒医药有限公司 |
主分类号: | A61K35/28 | 分类号: | A61K35/28;A61P1/00;A61P1/04;C12N5/0775 |
代理公司: | 常州佰业腾飞专利代理事务所(普通合伙) 32231 | 代理人: | 李嘉宁 |
地址: | 210000 江苏省南*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 应用于 克罗恩病 溃疡性 结肠炎 治疗 干细胞 | ||
1.一种应用于克罗恩病和溃疡性结肠炎治疗的干细胞,其特征在于,所述干细胞的制备,包括如下步骤:
步骤1:从一个病人的肘部抽取60ml血液;
步骤2:在室温72华氏度下,将100g的血液离心;
步骤3:将上述离心后得到的上清液吸出,分别以5ml的体积样品装入2管离心管中;
步骤4:在室温72华氏度下,将30g的血液离心,然后去除大部分上清液,每支离心管仅留1.5ml;
步骤5:在两根管子中重新组合,并将其中一根管子的内溶物添加到另一根管子中,加入钙通道活化剂;
步骤6:让样本凝结,然后加入60ml富含生长因子的血浆;
步骤7:从病人的下腹部做一个小的抽脂手术,抽取1000g脂肪用生理盐水洗多次,并添加细胞提取培养基;
步骤8:将1000g脂肪离心5min,丢弃上清液获取一个小颗粒,用8ml新鲜的生理盐水在离心管中重新配制成新的颗粒,并离心;
步骤9:与先前获得的富含生长因子的血浆60ml混合,重新构建含有2500万个细胞的颗粒,所述干细胞制备完毕。
2.根据权利要求1所述的一种应用于克罗恩病和溃疡性结肠炎治疗的干细胞,其特征在于,所述重组人骨髓间充质干细胞60ml静脉注射入患者体内,所述重组人骨髓间充质干细胞为颗粒和富含生长因子的血浆。
3.根据权利要求1所述的一种应用于克罗恩病和溃疡性结肠炎治疗的干细胞,其特征在于,所述克罗恩病和溃疡性结肠炎的分子靶点都是促炎细胞因子IL-12和IL-18。
4.根据权利要求1所述的一种应用于克罗恩病和溃疡性结肠炎治疗的干细胞,其特征在于,在步骤9中,使用或增强了两种抗炎细胞因子IL-10和TGF-beta。
5.根据权利要求1所述的一种应用于克罗恩病和溃疡性结肠炎治疗的干细胞,其特征在于,在步骤2和步骤4中,血液离心的时间为10min。
6.根据权利要求1所述的一种应用于克罗恩病和溃疡性结肠炎治疗的干细胞,其特征在于,在步骤3中,在5ml的体积样品装入2管15ml离心管中。
7.根据权利要求1所述的一种应用于克罗恩病和溃疡性结肠炎治疗的干细胞,其特征在于,在步骤5中,所述钙通道活化剂的加入量为1㎎。
8.根据权利要求1所述的一种应用于克罗恩病和溃疡性结肠炎治疗的干细胞,其特征在于,在步骤8中,所述1000g脂肪离心的时间为5min。
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