[发明专利]一种同时测定毛发中依替唑仑、氟硝西泮以及7氨基氟硝西泮的分析方法

说明书

本发明公开了一种同时测定毛发中依替唑仑、氟硝西泮以及7氨基氟硝西泮的分析方法，包括如下步骤：S1、溶液配制：标准品储备液的配制、提取溶液的配制、内标储备液的配制，待用；S2、样品制备：精密称取经过前处理的毛发样品10mg置于2mL的研磨管中，加入研磨珠适量，加入500μL所述提取溶液和50μL的100ng/mL阿普唑仑‑d5；于均质器中冷冻研磨，然后离心，上清液经0.22μm微孔滤膜过滤；S3、LC‑MS/MS分析测定。本发明的方法简便快速，一步提取，采用提取溶液在低温下湿磨提取头发中的目标物，研磨时间为10min，色谱运行时间短(6min)，灵敏度满足日常检案要求。

技术领域

本发明涉及药物检测技术领域，尤其涉及一种同时测定毛发中依替唑仑、氟硝西泮以及7氨基氟硝西泮的分析方法。

背景技术

氟硝西泮(Flunitrazepam)和依替唑仑(Etizolam)，又称“蓝精灵”和“红精灵”，是近期在网络上代购、娱乐场所中发现的新型毒品。在我国，氟硝西泮已被列入《精神药品品种名录(2013版)》二类药品目录进行管理，属于毒品范畴，明令禁止使用。氟硝西泮在临床上主要用作镇静催眠药或麻醉剂，因此常被用于药物辅助犯罪案件中。但近年来相关文献报道，因该药物强烈的致幻性和成瘾性，其滥用情况愈发严重，并且氟硝西泮与酒精同时使用可增强酒精的效果，因此广泛应用于娱乐场所。2011年，欧洲毒品监管中心(EuropeanMonitoring Centre for Drugs and DrugAddiction,EMCDDA)第一次报告依替唑仑是欧洲市场上流行的一种新型苯二氮类药物。文献报道依替唑仑滥用的趋势有所增加，已有几例死亡案例。网购的便利，使贩卖这类毒品更加容易，近年来，警方查获多起“蓝精灵”走私案，这些毒品的泛滥对公共健康安全造成现实危害或潜在威胁。

针对氟硝西泮和依替唑仑的检测，国内外多采用气相色谱-质谱联用、液相色谱-串联质谱法，主要检材包括血样和尿样。但是氟硝西泮和依替唑仑在体内的代谢较快，在血液和尿液中的检测时限较短。毛发因其检测时限长，能反映较长时间(几个月或几年)的药物使用情况，在认定吸毒成瘾方面具有独特的应用价值，与血液、尿液等生物检材相比，毛发样本采集无创且难以掺假，毛发检测可以提供长程的用药信息和用药频率，目前在我国已成为吸毒成瘾认定的证据。通过对毛发中滥用药物检测结果进行回顾性分析，有助于鉴别吸毒者或潜在的吸毒者。对滥用药物进行检测还可以分析毒品滥用的趋势和特征，以便可以采取适当的政策，如吸毒者的治疗、药物滥用的预防和干预等。因此应当通过毛发检测分析来监测我国毒品的滥用特征和趋势。毛发中毒(药)物的分离提取方法有甲醇超声法、酸水解法、碱消化法、酶消化法等。但很多提取方法存在一些缺陷，如酶消化法成本较高，酸水解或碱水解仅针对某种毒品。

由于这些药物的剂量为2mg/片，摄入剂量低，而毛发基质复杂，其中药物含量甚微，在pg/mg水平。因此需要建立高灵敏度、高特异性的毛发中依替唑仑、氟硝西泮及其代谢物7-氨基氟硝西泮的分析方法。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种同时测定毛发中依替唑仑、氟硝西泮以及7氨基氟硝西泮的分析方法，该分析方法具有高灵敏度和高特异性。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：

提供一种同时测定毛发中依替唑仑、氟硝西泮以及7氨基氟硝西泮的分析方法，包括如下步骤：

S1、溶液配制：

标准品储备液的配制：取依替唑仑、氟硝西泮以及7氨基氟硝西泮的标准品，混合后甲醇稀释至不同浓度待用；

提取溶液的配制：将甲酸铵溶液与甲醇和乙腈混合，并用甲酸溶液调节pH，即得提取溶液；

内标储备液的配制：取阿普唑仑-d5，用甲醇稀释，再用所述提取溶液稀释待用；

S2、样品制备：